li-cadhrin基因表达水平的变化对胃癌细胞生物学性状的影响研究.pdf

摘 要 目的： 我国胃癌发病率仍然居所有癌肿的第一位，死于胃癌人数约占全球该病死亡总人数的 1/4。多数患者为进展期晚期胃癌，手术根治率低，术前术后放化疗效果差，毒副作用大， 至今没有统一的化疗方案，因而肿瘤的基因治疗有望成为一种新的治疗策略。细胞的失调控 的异常增殖和凋亡的抑制是肿瘤发生的重要环节。肝肠-钙黏连蛋白(LI-cadherin ，CDH17) 作为一种与肿瘤侵袭和转移密切相关的蛋白,在胃黏膜上皮同样高特异性表达。最近发现 CDX2 与CDH17 与胃癌的发生、分化、转移等密切相关，二者有望成为胃癌诊断新的生物 学标志和肿瘤基因治疗新靶点。本研究抽提并鉴定CDH17/pcDNA3.1(-)真核表达质粒，脂质 体介导转染BGC-826 细胞，旨在观察外源CDH17 基因可否有效转染胃癌细胞并初步研究其 抗胃癌细胞生物学活性的效果，为进一步探讨CDH17 基因在抗肿瘤方面的机制及用于基因 治疗做准备。 方法： 1 瞬时转染胃癌细胞并鉴定CDH17 基因的表达：利用脂质体Lipofectamine 2000 瞬时转 染BGC-826 胃癌细胞，抽提转染48h 后细胞总蛋白，通过Western blot 检测CDH17 在蛋白 质水平的表达情况。 2 转染后的体外实验：实验分三组，取48h 转染CDH17/pcDNA3.1(-)质粒、阴性对照组 及空载体pcDNA3.1(-)质粒组。鉴定转染CDH17 成功的BGC-826 细胞分别做侵袭实验和划 痕实验。 结果: 1 瞬时转染后应用Western blot 分别检测到CDH17 基因的表达。 2 转染 CDH17/pcDNA3.1(-)质粒的BGC-826 细胞的侵袭力、迁移能力较转染阴性对照 组及空载体pcDNA3.1(-)质粒组BGC-826 细胞明显降低((P0.05) 。 结论 1. CDH17 蛋白在人胃腺癌细胞株BGC-826 中通过Western-blot 蛋白质印 迹法检测呈低表达。 2. 外源性CDH17 基因转染入胃腺癌细胞株BGC-826 中可提高人胃腺癌细 胞株BGC-826 细胞内CDH17 蛋白水平表达。 3.CDH17/pcDNA3.1(-)真核表达重组质粒转染入胃癌BGC-826 细胞后，能降 低胃癌细胞的侵袭能力及迁移能力，其作用方式可能是通过多种途径抑制人胃腺 癌细胞株BGC-826 的侵袭和转移能力。 关键词CDH17 ；转染；胃肿瘤；侵袭 1 Abstract Objectives： The incidence rate of gastric carcinoma is also in the first position among manlignant tumors in our country,and the mortality is about one quarter of global ones.Most patients have been progressing to advanced stage at the time of diagnosis. The rate of radical resection is lower, treatments including radiation, chemotherapy or preoperative chemotherapy have little infuence,even exert great side effect to patients.And at present having no normative chemotherapy, therefore the gene therapy has been introduced and displayed its promising.