盆腔器官脱垂患主韧带和阴道前壁中赖氨酰氧化酶、ⅰ型胶原蛋白的表达及意义.pdf

·中文论著摘要· 盆腔器官脱垂患者主韧带和阴道前壁中赖氨酰氧化 酶、I型胶原蛋白的表达及意义 目 的 盆腔的正常结构和功能有赖于盆底支持组织的正常，胶原和弹性蛋白作为结 缔组织的主要成分起着重要的作用，赖氨酰氧化酶(1ysyloxidase，LOX)作为胶原 和弹性蛋白交联的关键酶对于盆腔器官的支持也起着重要的作用。胶原的异常和 或赖氨酰氧化酶的异常可能导致盆腔器官脱垂(PelvicOraganProlapse，POP)I拘发 生。本研究通过检钡IJPOP患者主韧带和阴道前壁中LOX、I型胶原蛋白的表达情 况，探讨二者在盆腔器官脱垂发生发展中的作用。 材料和方法 一、材料 到2008年11月间中国医科大学附属盛京医院妇科手术切除的组织。所有组织均 经福尔马林固定，常规石蜡包埋。 二、主要试剂 型胶原蛋白多克隆抗体购于武汉博士德生物工程有限公司；S-P免疫组化试剂盒、 二胺基联苯胺(DAB)显色剂、PBS缓冲液、胃蛋白酶等购于北京中杉金桥生物 技术有限公司。 三、方法 免疫组织化学染色，按链霉素抗生物素蛋白．过氧化物酶(S．P)法行免疫组 织化学染色。切片常规脱蜡，胃蛋白酶室温下抗原修复15分钟，一抗4。C孵育过 夜，DAB显色，苏木素复染。用PBS代替一抗作为阴性对照。 四、结果判定 采用免疫组化半定量法，每张切片随机选取5个高倍视野(x400)计数着色强 度和染色面积评分(3人单独计数)，染色程度：不着色记为0分，淡黄色记为1 分，黄色记为2分，棕黄色记为3分。染色面积的百分数：无染色面积为0分，翌O％ 分。将两评分相乘所得的总分数作为加权染色强度，0~2分为阴性(．)；2~4分为弱 阳性(+)；4+6分为阳性(++)；6~12分为强阳性(卅)。 以上染色深度均以多数细胞和间质的呈色反应判定，为减少主观片面性，每 例分别由3位病理科医师各自阅片，然后核对所得结果，获得共识。 五、统计学分析 所有数据资料的统计采用SPSSl3．0软件进行处理。年龄等计量资料正态分布 两组间比较采用两独立样本t检验，计数资料结果比较用Person chi．square检验； Spearman秩相关进行指标间的相关分析。以PO．05作为差异有统计学意义。 结 果 一、LOX的表达情况 LOX主要表达于主韧带、阴道前壁的细胞外基质中，呈黄色或黄褐色，弥漫 性或灶性分布。LOX在POP患者未绝经组主韧带、阴道前壁中的阳性表达率为 29．6％、22．2％，而在POP患者绝经组主韧带、阴道前壁中的阳性表达率为46．3％、 41．5％；LOX在对照组未绝经组主韧带、阴道前壁中的阳性表达率为66．7％、73．9％， 而在对照绝经组主韧带、阴道前壁中的阳性表达率为73．9％、69．6％。统计学分析 显示LOX在POP患者未绝经组和对照组未绝经组主韧带、阴道前壁中的表达差异 照组绝经组主韧带、阴道前壁中的表达差异也具有显著性(xZ=-4．551，PO．05； x2=5．401，PO．05)。 二、I型胶原蛋白的表达情况 I型胶原蛋白表达呈黄褐色或棕褐色，弥漫性或灶性分布，主要位于细胞外 基质中。I型胶原蛋白在POP患者未绝经组主韧带、阴道前壁中的阳性表达率为 33．3％、25．9％，而在POP患者绝经组主韧带、阴道前壁中的阳性表达率为39．O％、 2 34．1％；I型胶原蛋白在对照组未绝经组主韧带、阴道前壁中的阳性表达率为 66．7％、65．2％，而在对照组绝经组主韧带、阴道前壁中的阳性表达率为65．9％、 73．9％。统计学分析显示I型胶原蛋白在POP患者未绝经组和对照组未绝经组主韧 I型胶原蛋白在POP患者绝经组和对照组绝经组主韧带、阴道前壁中的表达差异 也具有显著性(xk-4．047，PO．05；x2=9．329，PO．05)。 三、POP组主韧带、阴道前壁中LOX和I型胶原蛋白表达的相关 性 对POP组进行相关性分析显示，POP患者未绝经组主韧带、阴道前壁中LOX 绝经组主韧带、阴道前壁中LOX和I型胶原蛋白表达也有相关性(rs=O．341， 带和阴道前壁中的表达存在正相关。