盐酸洛拉曲克在外促进人肝癌细胞hepg-2凋亡的实验研究.pdfVIP

盐酸洛拉曲克在体外促进人肝癌细胞 HepG-2凋亡的实验研究 硕士研究生： 张雪琛 指导教师： 高亚杰教授 专业名称： 肿瘤学 摘 要 目的：研究盐酸洛拉曲克对体外培养人肝癌细胞HepG．2的增殖抑 制作用和对肝癌细胞HepG．2凋亡抑制基因Bcl．2表达的影响。 方法：MTT比色法观察盐酸洛拉曲克对人肝癌细胞株HepG．2增殖 的抑制作用；用免疫细胞化学染色法检测其对人肝癌细胞HepG．2凋亡 抑制基因Bel．2的表达影响。 结果： l、实验前HepG．2细胞为贴壁的梭形细胞，细胞排列紧密，生长增 殖速度快，每2～3天需传一代；在加入化疗药物盐酸洛拉曲克12h后镜 下观察细胞形态变为圆形，体积变小，细胞密度增加和细胞固缩，细胞 膜和核膜完整，线粒体发生超浓缩和染色质进行性圃缩，并向核周“崩 溃形成一个或多个块状结构、“致密球体或向外“发芽形成葡萄串 样小球体。24后观察镜下视野模糊，细胞膜损伤、肿胀、裂解。 2、肿瘤细胞体外药物敏感性检测即MTT法，试验设立三组药物即 (ADM组、DDP组、盐酸洛拉曲克组)每组药物设立四个浓度梯度， 同时设立空白对照组，结果显示，盐酸洛拉曲克对人肝癌细胞HepG．2 的生长具有显著的抑制作用，促进肿瘤细胞的凋亡，高浓度组的生长抑 制率可达80．15％，具有良好的量效关系，其中高浓度给药组的抑瘤率最 高，其次是中浓度组，对每个瘤株均重复实验3次，实验结果的重复性 比较好。当各组药物浓度达到最大时盐酸洛拉曲克组与阳性对照组 5％、48．12％、 (ADM组和DDP组)比较其肿瘤细胞的抑制率分为80．1 51．69％．差异有统计学意义(P-0．013，xz检验)。 3、免疫细胞化学染色结果显示，对不同浓度盐酸洛拉曲克作用的肝 癌HepG．2细胞Bcl．2的表达进行检测，未用药物干预组(对照组)阳性 细胞呈棕黄色，染色较深，颗粒分布密集，低浓度组(21．tg／m1)与对照 对照组阳性细胞呈淡染，其中高浓度组尤为明显，颗粒分布疏松。随着 盐酸洛拉曲克浓度的递增，凋亡指数逐渐增加，即肿瘤细胞迅速减少， 同时与对照组比较P0．05，具有统计学意义。 结论： l、盐酸洛拉曲克对人肝癌细胞HepG．2的生长具有显著地抑制作用， 其单药组生长抑制率明显高于ADM组和DDP组，且高剂量组抑制率明 显高于其它剂量组，具有良好的量效关系。 2、盐酸洛拉曲克能下调凋亡抑制基因Bel．2的表达，促进肿瘤细胞 的凋亡。 细胞凋亡 Bcl-2 关键词：盐酸洛拉曲克HepG-2 2 Nolatrexed in vitroto the hydrochloride promote human cell in hepatomaapoptosis HepG．．2 Experimentalstudy Master Xueche degree candidate：Zhang Gaoie