磁珠法分选cd4lt;#39;+gt;细胞及不同来源cd34lt;#39;+gt;细胞某些特性比较.pdfVIP

t“西医科大学硕上学位论文 摘 要 目的：探讨免疫磁珠法分选骨髓CD34+细胞的方法，比较不同因素和条件对免疫磁珠法分 选CD34+细胞的影响，提高其分选纯度，寻求一种最佳的分选条件。了解胚胎与成人骨髓 CD34+细胞某些特性，为某些骨髓CD34+细胞试验提供新的对照组来源。 方法：应用密度梯度离心法分离人骨髓单个核细胞，用免疫磁珠法分选骨髓CD34+细胞， 对其分选过程中相关环节：磁珠与MNC孵育温度，摇床的种类以及红细胞裂解液的使用 等不断改进。根据以上几个影响因素分为以下4组： 常温下水平摇床上轻轻摇动45分钟，分选出CD34+细胞；2、在组l基础上，用碎冰盒 替代冰块进行磁珠与MNC孵育；3、在组2基础上，用万向摇床替代水平摇床；4、将 分出的MNC中预先加入红细胞裂解液裂解残留红细胞，按组3步骤分选CD34+细胞。 台盼蓝染色法检测细胞活性，通过流式细胞仪检测分选出的CD34+细胞纯度。 Notchl、Notch2、HLA．C、PDCDl、PKC．BI的mRNA表达水平。 持在90％左右。 PKC．BI的mIⅢA表达水平与成人组比较差异均无统计学意义(P0．05)。 结论：碎冰盒、万向摇床及红细胞裂解液的使用能有效地提高免疫磁珠法分选骨髓CD34+ 细胞的纯度，免疫磁珠法可以作为分选造血干细胞的理想方法。 常对照使用。 免疫磁珠； 分选；胚胎；成人 关键词：CD34+细胞； 山西医科人学硕士学位论文 IsoIationofCD34+censwith beadsand immunomagnetic ofCD34+celIs’ comparativestudy certaincharacteristicsfrom dif．f．erentresOurces Abstract aideal methodfor CD34+cellsf如mbone objective：1’0eXplore immunomagneticisolating the CD34+cells tlle order 姗w，wKch innuencef．actors．In c锄iInprovep嘶哆of by changing to100kforanewsourceof stemcellsC0ntroliIlsome detected hematopoietic experiments，、Ⅳe thecertainch嬲lcteriSticsofCD34+cellsderived舶ma11dadultbone emb巧o m锄w． aIld method、Ⅳereusedt0isolated Methods：Density蓼adientcemrifhgasionimmunomag口etic hum趾boneman．0wmononuclear of related cells，tlle