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实验一 脑垂体的摘取与保存 一、实验目的 1．掌握各种常见催产剂物理特性。 2．掌握脑垂体的摘取方法。 二、实验材料 1．实验材料：各种催产剂、鲤。 2．实验器材：解剖刀、解剖剪、镊子等 3．实验试剂：无水酒精。 三、实验内容与步骤 （一）知识回顾 常见催产剂种类的介绍 1．鱼类脑垂体（PG） 脑垂体分泌促性腺激素它直接作用于鱼类性腺，具有诱导鱼类排卵的作用；同时也具有促进性腺发育、促进雌雄鱼性激素产生等作用。 新鲜的脑垂体，经过丙酮或乙醇中脱水脱脂、阴干，放在干燥器中密封保存。使用时，按每千克鱼体3~4mg剂量注入亲鱼体。 2．绒毛膜促性腺激素（HCG） HCG是从怀孕2~4个月的孕妇尿中提取的一种促性腺激素，它直接作用于鱼类性腺，具有诱导鱼类排卵的作用；同时也具有促进性腺发育、促进雌雄鱼性激素产生等作用。 HCG为白色或黄色粉末，一般分装在安培瓶中，易溶于水，遇热和受潮易变质。应避光、低温、干燥保存。它以国际单位（IU）计量。HCG适用于鲢、鳙的催产，使用剂量不宜太大，一般每千克亲鱼用800~1 000 IU，否则亲鱼容易产生抗体，影响以后的催产效果，对亲鱼本身的生长也有一定的危害。 3．促黄体素释放激素类似物（LRH-A） 该激素是人工合成的化学制剂，它是一种高效催产剂。它作用于亲鱼的脑垂体，由脑垂体根据自身的发育情况合成和释放适量的促性腺激素来作用于性腺。其对草鱼催产效果较明显，用量为每千克亲鱼10~40 μg。 LRH-A2对促性腺激素释放的活性比LRH-A高10多倍； LRH-A3是一种比LRH-A效果更好的促排卵素，尤其适用子鲢、鳙亲鱼的催产，而且其使用剂量可为LRH-A的1/10。 4．高效催产合剂 由利血平（RES）或地欧酮（DOM）与LRH-A组成，能显著增强LRH-A刺激鱼类PG促性腺激素的分泌。 5．A、B型混合催产剂 A型催产剂是由HCG和适量的LRH-A2混合而成，主要用于催产鲢； B型催产剂是由HCG和适量LRH-A3组成，用于催产鳙效果较好。 （二）脑垂体的摘取与保存方法 1、脑垂体的摘取的时间 用于取脑垂体的鱼通常是达到性成熟的新鲜鲤、鲫。 摘取的时间最好是在冬季和春季鲤鱼产卵之前，此时垂体中促性腺激素的含量最高。 位置：间脑下面的碟骨鞍里 2、脑垂体的摘取方法 方法一：用刀剖开鱼两眼上缘的颅顶骨，除去脂肪，露出鱼脑，在其前下方可见一小白点即为脑垂体，用镊子将垂体轻轻挑出，垂体应完好无损。 方法二：从鳃盖的侧面摘取，即先将鱼的鳃盖掀起，用自制摘取刀（将一段8号铁丝一端锤扁略弯曲成铲形）剥去鳃后，插入蝶骨缝内，将蝶骨挑起，便可露出乳白色的垂体，用摘取刀轻轻挑出完整无损的垂体。 此法取垂体操作容易，速度快，特别是不会损伤鱼体外形，不至影响其商品价值，故生产单位多用此法。 3、脑垂体的保存方法 将摘取的垂体除去血污和脂肪等组织，放入体积为垂体20倍的丙酮或无水酒精中，脱脂，脱水，浸泡8~12 h后换一次丙酮，连续处理2~3次。 将垂体取出，放在干净的白纸上，经20~30 min晾干后立即装入干燥、清洁的小瓶中，用蜡封口存放在阴凉处。 也可在换过一次丙酮后，连同浸液一起密封保存，封存好的垂体可保存2~3年。 四、作业 实验报告。 五、思考题 催产剂的催产原理如何。 * * *