calt;39;2+gt;信号对肝癌细胞乙酰肝素酶（hpa）表达的影响.pdfVIP

中文摘要 Ca2+信号对肝癌细胞乙酰肝素酶(HPA) 表达的影晌 摘 要 目的：肝细胞癌是我国最常见的恶性肿瘤之一，恶性程 度高，易早期发生转移，而且虽采用手术或介入等综合治疗 后复发率仍较高，其原因与肝细胞癌易侵袭转移的生物学特 性有关。研究表明，肝癌细胞的运动、侵袭和转移特性直接 与肿瘤组织中HPA的高水平表达有关。明确HPA的表达与 分泌机制和探索有效的治疗方法依然是临床研究的一大挑 酶，在包括肝癌在内的多种恶性肿瘤中普遍高表达，也是目 sulfate，HS) 前发现的唯一可以降解硫酸乙酰肝素(heparan 活性的酶，它通过切断硫酸乙酰肝素蛋白多糖(heparan sulfate (extracellullar 生成，通过多种途径直接、间接促进肿瘤生长和侵袭转移。 研究表明，肝癌细胞内存在Ca2+库依赖的Ca2+内流，是 内稳定的高Ca2+水平可明显增强肝癌细胞体外侵袭粘附的 能力。本实验将细胞内Ca2+调控通路引入}Ⅱ，A的表达与分 泌过程，探讨Ca2+在}Ⅱ)A的表达与分泌过程中发挥的作用， 可为进一步探讨抑制肝癌侵袭和转移的治疗方法提供可靠 的实验依据和理论基础。 中文摘要 方法：肝癌细胞株SMMC。7721分对照组和试验组。对 a：2+ 照组细胞常规培养，试验组细胞分别在培养体系中引入C 及其激动剂毒胡萝b内酯(TG)和TG抑制剂S-亚硝基．乙酰 青霉胺(SNAP)干预，按时收获细胞。采用逆转录．聚合酶链 式反应(RT-PCR)技术，测定细胞HPAmRNA含量，以 13-actin作为内参照标准，对扩增产物通过凝胶扫描仪进行 HPA表达水平的参数，对HPA产物进行相对定量；以 Westem I-IPA蛋白表达的变化，并进行相对定量分析。数据采用 SPSSl2．0统计分析软件进行分析。 结果：1SMMC．772l肝癌细胞HPAmRNA在各实验组 mRNA表达的 中的表达：在加入不同浓度CaCl2后，HPA 电泳条带亮度以及相对表达量无明显差异：在TO以及 SNAP组电泳条带亮度以及相对表达量也无明显差异。可 有影响。 2 HPA蛋白表达与分泌的影响：在加入0．2、0．6、0．8、1．0、 mmol／L 均有升高(P0．05)，在0．2mmol／L～1．0CaCl2浓度 之间呈一定的浓度依赖性，在1．0mmol／LCaCl2浓度梯度下， 细胞内以及培养上清中HPA蛋白达稳定水平。肝癌细胞内 Ca2+可有效的诱导肝癌细胞合成并分泌}碑A蛋白。 TG处理 }Ⅱ)A蛋白表达与分泌的影响：本实验中4I，tmol／L 中文摘要 的表达与分泌。 4 制了TG诱导的肝癌细胞HPA蛋白的表达与分泌，但对无 TG处理的正常调控下的细胞则无明显的抑制作用。 没有影响，在蛋白水平可有效的诱导肝癌细胞合成并分泌 HPA。 2肝癌细胞内Ca2+库释放诱导剂毒胡萝卜内酯(TG)可 明显诱导HPA蛋白的表达与分泌；而抑制剂S-亚硝基．乙 酰青霉胺(SNAP)则抑制了TG的诱导作用。 信号通路在蛋白水平增强了HPA的表达和分泌，进而降解 细胞外基质(ECM)和血管基底膜(BM)，诱导血管新生，促 进肿瘤细胞的侵袭和转移过程。 中文摘要 英文摘要 Effectof on of Ca2+SignalExpressionHeparanase in CarcinomaCells