第一章植物细胞-wangting资料.pptVIP

★Gamborg等的B5培养基（1968）及 衍生出来的其他培养基适用于植物 细胞及原生质体的培养； ★E1培养基是Phillip和Colins 为 了培养苜蓿植物而改进的Ls培养基， 特别适合大豆培养，还可用于胚胎 形成和原生质体的培养； 表2　B5培养基的组成和配方 组成成分 数量(mg/l） 组成成分 数量(mg/l) KNO3 2500 FeSO4·7H2O 27.8 CaCl2·2H2O 150 CuSO4·5H2O 0.025 MgSO4·7H2O 250 蔗糖 40 (NH4)2SO4 134 pH 5.5 KI 0.75 肌醇 100 H3BO4 3.0 烟酸 1.0 MnSO4·4H2O 10 盐酸吡哆醇 1.0 ZnSO4·7H2O 2.0 激动素 0.1 Na2MoO4·2H2O 0.25 2,4－D 0.1－1.0 CoCl2·6H2O 0.025 盐酸硫铵 10 Na2-EDTA 37.3 　　　　　　　 ★ N6培养基是我国朱至清（1978）为水稻等禾谷类作物花药培养而设计的。 ★其特点是硝酸盐、铵盐浓度较低，适合于禾本植物的组织培养； 　 　　表3 N6培养基的组成和配方 组成成分 数量(mg/l) 组成成分 (mg/l) KNO3 2.3 Na2－EDTA 37.3 CaCl2·2H2O 166 FeSO4·7H2O 27.8 MgSO4·7H2O 185 蔗糖 50 KH2PO4 400 pH 5.8 (NH4)2SO4 463 烟酸 0.5 KI 0.8 盐酸吡哆醇 0.5 H3BO3 1.6 甘氨酸 2.0 MnSO4·4H2O 4.4 盐酸硫铵 1.0 ZnSO4·7H2O 1.5 与微生物培养基的区别 需要大量无机盐 多种微生物和激素 一般采用无机氮源 一般以蔗糖为碳源 （三）培养基的配制和灭菌 １培养基及母液的配制： 1）量取母液：营养元素和激素。 2）称量蔗糖、琼脂，放入600ml左右蒸馏水的锅内，电路上加热，使琼脂溶化。 3）加入母液，混合均匀，调整pH值。 4）分装入瓶，每瓶40－50ml。 5）封口：用4－6层称量纸封口，之后灭菌备用。 各种试剂母液浓度及配制几种基本培养基的用量 培养基成分 母液浓度（mg/ml 几种基本培养基1L吸取母液量（ml) MS MT 改良White Nitsch N6 B5 KNO3 19000/500 50 50 2.1 3.29 74.47 65.79 Ca(NO3)2·4H2O 3470/100 / / 8.65 14.4 / / NH4NO3 16500/500 50 50 / / / / (NH4)2SO4 9260/200 / / / / 10 3.24 MgSO4·7H2O 7400/200 10 10 19.46 3.38 5.0 6.76 KH2PO4 3400/200 10 10 / 7.35 23.53 / NaH2PO4·2H2O / / 5.0 / / 10 CaCl2·4H2O 4400/100 10 10 / / 3.77 / MnSO4·4H2O 500/100 4.46 4.46 1.4 0.6 0.88 2.0 ZnSO4·7H2O 200/100 4.30 4.30 1.5 0.25 0.75 1.0 H3BO3 200/100 3.10 3.10 0.75 0.25 0.80 1.5 NaMoO4·2H2O 5/100 5.0 / / 0.5 / 5.0 CuSO4·5H2O 2.5/100 1.0 1.0 0.04 1.0 / 10 铁盐EDTA FeSO4·7H2O 1862.5/200 1392.5/200 4.0 4.0 / / 4.0 4.0 培养基成分 母液浓度（mg/ml 几种基本培养基1L吸取母液量（ml) MS MT 改良White Nitsch N6 B5 肌醇 2000/100 5.0 5.0 5.0 / / 5.0 烟酸 100/100 0.5 5.0 0.3 1.25 0.5 0.63 甘氨酸 150/100 1.32 1.32 8.0 5.0 3.33 / 硫胺酸 10/100 1.0 100 1.0 2.5 10 100 吡哆素 10/100 5.0 100 1.0 2.5 5.0 10 KI 16.6/100 5.0 5.0 4.5 / 4.82 / C