第一章遗传物质的分子结构性质和功能资料.pptVIP

药学分子生物学 Pharmaceutical molecular biology 绪论第一章 遗传物质的分子结构、性质和功能 药剂药代教研室：李唐棣 什么是分子生物学？ 1938年洛克菲勒基金会主席Warren Weaver在年终报告里提出“渐渐地又产生了一门科学—分子生物学，这是揭开许多生命细胞基本单元奥秘的开端……” 基金会对有关蛋白质X晶体衍射提供了资助 1938年，Astburu, W.T.和Bell,F.D.首次发表脱氧核糖核酸的X光衍射研究。 分子生物学（molecular biology）是在分子水平研究生命现象的科学，是现代生命科学的“共同语言”，它的核心内容是通过对生物的物质基础—核酸、蛋白质、多糖等生物大分子结构、功能及其相互作用的研究来阐明生命的分子基础。 狭义的分子生物学侧重于核酸的分子生物学，基因的复制、转录、表达和调控等。 请回答以下几个问题? 遗传物质是DNA、RAN、还是pr？ 描述DNA的一级结构、二级结构？ 列举你所知道的RAN种类和主要功能？ 复习一下证实遗传物质的本质是核酸的三个经典实验？ 双螺旋结构的多态性与Z-DNA DNA的三级结构与三链DNA snmRNAs与核酶 核酸的变性、复性和杂交 RNAi 双螺旋结构的构象变异 引起DNA双螺旋构象改变的因素有: 核苷酸顺序 碱基组成 盐的种类 相对湿度 Z-DNA的发现 1972年，Pohl et al 发现poly(dG-dC)在高盐下旋光性发生改变； 1979年，Wang A.H-J(王惠君)，A.Rich对d(CGCGCG)单晶作X衍射分析提出Z-DNA模型。 Z-DNA的结构特点 核糖磷酸骨架呈“之”字形（Zigzag）走向。 左旋 G的糖苷健呈顺式（Syn），使G残基位于分子表面。 分子外形呈波形。 大沟消失，小沟窄而深。 每个螺旋有12 bp。 Z-DNA存在的条件 高盐：NaCl2mol/L,MgCl20.7mol/L Pu,Py相间排列。 在活细胞中如果m5C,则无需嘌呤-嘧啶相间排列，在生理盐水浓度下即可产生Z型。 体内的多胺化合物，如精胺、亚胺及亚精胺和阳离子一样，可和磷酸基团结合，使B-DNA转变为Z-DNA. 某些蛋白质如Z-DNA结合蛋白带有正电荷，可使DNA周围形成局部高盐浓度的微环境。 Z-DNA的生物学意义 DNA拓扑异构酶 拓扑异构酶作用特点 既能切断、又能连接磷酸二酯键 分类：拓扑异构酶Ⅰ; 拓扑异构酶Ⅱ 作用机制： 三碱基体 Py-Pu-Py型：T-A.T、C-G.C+ ，Hoogsteen键 Pu-Pu-Py型：G.G-C 、A.A-T，反Hoogsteen键 第三节 核酸的功能 一、 DNA的功能 DNA的基本功能是以基因的形式荷载遗传信息，并作为基因复制和转录的模板。它是生命遗传的物质基础，也是个体生命活动的信息基础。 核酶（Ribozyme） 美国科学家Cech和Altman发现了核酶(ribozyme)。最早发现大肠杆菌RNase P（375nt RNA +20kD多肽），蛋白质部分除去后，在体外高浓度Mg2+存在下，留下的RNA部分具有与全酶相同的催化活性。 是指本质为RNA或以RNA为主含有蛋白质辅基的一类具有催化功能的物质。 RNA单独作用就能进行催化反应。主要参加RNA的加工与成熟。可分为异体催化，如RNase P，tRNA 5`末端的剪切；自体催化，Ⅰ、Ⅱ类内含子自我剪接 核酸杂交技术的应用 应用复性动力学原理 杂交可以在固相或液相上进行；硝酸纤维素膜，尼龙膜 探针（probe）： 一小段用同位素、生物素或荧光染料标记，其末端或全链的序列已知的多聚核苷酸，与固定在NC膜上的核苷酸结合，判断是否有同源的核酸分子存在。 探针的标记：32P、荧光基团、生物素 印迹技术的类别及应用 （一）DNA印迹技术(Southern blotting) 检测目标DNA片段 （二）RNA印迹技术(northern blotting) 用于RNA的定性定量分析。 （三）蛋白质的印迹分析(Western blotting) 用于蛋白质定性定量及相互作用研究 五、生物芯片-基因芯片 基因芯片(gene chip), 也称DNA芯片(DNA chip) 是指将数以万计的cDNA片段或预先设计好的寡核苷酸作为探针，有规律地紧密排列固定于单位面积的支持物上 ，形成高密度的探针点阵，与待分析样品中的同源寡核苷酸分子杂交。 原理:核酸分子杂交 用途:核酸测序\基因诊断\表达水平研究 第六节 反义核酸与反义技术 反义核酸：根据碱基互补原理，用人工合成或生物体