UV 理论简介(讲课用).docVIP

岛 津 紫 外 光 谱 培 训 一、UV 理论简介 研究和测定光能和物质相互作用的学科称为光谱学。分光光度计则是用于测定这种相互作用的仪器。通过分光测定可以获得关于样品的成分和确认样品成分的定性信息，也用于定量测定，获得物质在样品中的含量。 二、岛津紫外分光光度计分类 分光光度计根据其设计可分成两大类，色散型和二极管阵列分光光度计。 1、色散型分光光度计 UVmini-1240 UV-1601/1601PC UV-2401PC/2450 UV-2501PC/2550 UV-3101PC/3150 下图是色散型分光光度计的基本单元： 2、二极管阵列分光光度计 MultiSpec-1500 二极管阵列分光光度计，从光源出来的光经过准直通过样品，在通过样品后，光束照射到一排二极管上（二极管阵列），每一个二极管都经过优化，对各自检测的波长有最高的灵敏度。各波长由其相应的二极管测定，因此各波长几乎是同时得到测定。 下图是二极管阵列分光光度计的示意图： 三、分光光度计单元部件 1、光源 紫外/可见/近红外分光光度计最常使用的光源，在可见光区采用卤素钨灯，一般用于 350 ~ 750 nm；紫外区采用小型的氘弧灯，用于190 ~ 350 nm。所有岛津公司的分光光度计都采用碘钨灯和氘灯作为光源。碘钨灯是灯丝型的，使用寿命约 2，000 小时。氘灯是一种内含氘气的放电管，小的电弧放电点燃氘气，产生紫外光。 2、入射狭缝/准直单元 分光光度计中，从光源（灯）出来的光都要通过很窄的狭缝，该狭缝通常称为入射狭缝。经过入射狭缝后，光进入到一定的准直单元。狭缝和准直单元的作用是使光束成为平行光束，然后通过仪器的其他部分。 3、波长选择单元 分光光度计都有分离和识别不同波长光的波长选择单元。几乎所有的分光光度计都使用光栅，把光源的光分成不同波长的光。光栅和出射狭缝的特性，以及光栅和出射狭缝的安排决定了仪器的分辩率 (或带通)。 所谓的分辩率(或带通)表示一个仪器分辨不同波长光的能力。要区分两个不同的波长的光，关键是仪器的分辩率或仪器的带通必须小于两个波长之差的十分之一。因此，要检测 260 和 280 nm 光的差别，仪器的分辩率或带通至少是 2 nm。要区分 500 和 501 nm，仪器的分辩率必须是 0.1 nm。 4、样品架 有的分光光度计都有一定的池 (样品) 架。分光光度计测定的样品可能是固体，液体或气体，以液体样品居多。下面的示意图显示池架的规格、光束和池架的相对位置。 当狭缝宽是 2 nm 时光束大小： UV-1601PC： 1 mm 宽，10 mm 高 UV-2101PC： 4 mm 宽，11 mm 高 UV-2401/2501PC： 1 mm 宽，12 mm 高 UV-3101PC： 2 mm 宽，16 mm 高 5、检测器：紫外可见分光光度计的检测器一般是用于 UV-1201 和 UV-1601的硅光二极管或用于 UV-2401，UV-2501，和 UV-3101的光电倍增管。 四、光学系统 UV-2401PC CH 光束斩光镜 G 单色器光栅 D2 氘灯 WI 碘钨灯 S1 入射狭缝M1~ M10反射镜 (M6 是半透半反镜) S2 出射狭缝 PM 光电倍增管 F 滤光片 W 石英窗 UV-2501PC CH 光束 斩光镜 G1 初级单色器的光栅 D2 氘灯 G2 次级单色器的光栅 S1 入射狭缝 WI 碘钨灯 S2 入射狭缝 M1~ M12 反射镜 S3 出射狭缝 PM 光电倍增管 F 滤光片 W 石英窗 五、电子系统 UV-2401PC UV-2501PC 主机的（CPU）通过I/O端口控制光源的开/关、光源的转换、滤光片的转换、狭缝的变换以及波长扫描脉冲电机的控制。 检测器接受样品池和参比池以50Hz频率交替的光信号，之后通过前置放大板分成样品信号，参比信号和暗信号。 通过这些，负高压控制样品和参比信号及光源或波长强度，信号经过A/D及I/O端口传给CPU。 另外，暗电流用于校正光电倍增管得暗信号。 透射率（T%）通过处理器来运算（样品信号 / 参比信号）。如基线校正，对数运算（Abs），平滑处理等结果传输给微机，并在CRT上显示出谱图和光度值。 六、初始化步骤 1、UV-2401PC初始化步骤 步骤 项目 说明 1 初始化大规模集成电路 参数的初始化 2 检查 ROM 检查分光光度计只读存储器 3 检查 RAM 检查随机存储器 4 初始化滤光片马达 检测杂散光切割滤光片马达位置,，滤光片转换系统的步进