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溪黄草提取物抗疫肝损伤作用机理研究
摘要
病毒性肝炎是一种全世界常见病,我国属流行严重地区,慢性肝炎的流行严重影
响了人民群众的身体健康。由于慢性乙型肝炎是引起肝硬化和原发性肝癌的主要原
因,因此在全世界范围内,开展慢性肝炎防治新手段的研究一直是医学界研究的热点。
目前现代医学对慢性肝炎的治疗药物主要分为三类:①抗病毒药物,主要有干扰
素和几种核苷类类似物,两大类药物各有优势,也各有缺点,前者疗效肯定,血清转
换率较高,有确切的治疗终点,但使用不方便,副作用较大;后者服用方便,疗效可
靠,但需要长期用药,治疗终点不确切,易耐药; ②免疫调节治疗,包括胸腺肽、
治疗性疫苗等,前者调节免疫,增强机体的免疫清除能力,从而实现抑制甚至清除病
毒的作用,可联合核苷类似物或干扰素进行治疗,但疗效颇有争议,目前尚无可供临
床使用的用于治疗的HBV感染的治疗性疫苗;③护肝降酶药物,如联苯双酯、五味
子制剂及某些中草药,这类药物对降低血清转氨酶,退黄疸有一定效果,其中尤以我
国自行研发的联苯双酯效果为优,但容易出现停药后反跳,此类药物副作用少,可用
于肝炎的辅助性治疗.
由于肝炎病毒复制的特殊性,导致抗病毒剂的寻找在全世界都是一个难题。机体
自身的免疫应答在病毒性肝炎的发展机制中具有非常重要的意义,乙型肝炎病毒对肝
细胞的损伤主要是由免疫反应引起的,除抗病毒外,促进损伤肝细胞的修复以及寻找
针对性较强的免疫调节药物,也是该类疾病治疗药物研究的方向之一。从中草药中研
究开发保肝药物是一极具前景的领域,目前由日本从甘草中研制开发的甘草甜素类药
物和欧洲所开发的水飞蓟素,是国际天然药物市场上重要的保肝产品,我国自建国以
来,在抗肝炎药物的研发领域,一直投入了大量的人力和物力,致力于在中草药中寻
找和研发具有抗病毒活性的药物以及具有保肝效果的天然药物制剂,然而由于中药药
效物质基础未明及作用机理不清楚,该类药物的研发基本上处于低水平重复状态,至
今未有高效低毒的新药问世。
进行抗肝炎药物的筛选及作用机理研究,建立尽可能的符合临床病理过程的动物
模型尤为关键。由于机体自身对肝炎病毒的免疫反应引起的肝细胞损伤是慢性肝炎的
主要病理机制,故建立免疫肝损伤模型是研究治肝炎新药的较理想模型。近年来运用
刀豆蛋白A诱发的小鼠特异性肝损伤,其致病特点与我们目前所知的人类病毒性肝炎
的病理机制有许多的相似之处,是典型的T细胞介导的免疫性肝损害,因此本研究选
择Coma,诱导免疫性肝损伤模型,来探讨溪黄草治疗免疫肝损伤的作用机理。
溪黄草作广东民间习用草药,具有清热利湿,退黄、凉血散瘀等之功效,经资源
学调查证实市场上其主流品种为狭基线纹香茶菜。既往的研究结果提示,狭基线纹香
茶菜的水提物和醇提物均具有保肝、抑菌、抗炎等作用。进而对水提物进行了免疫肝
损伤保护作用的研究,发现对ConA诱导的免疫肝损伤具有显著的保护作用。我校热
研所等研究单位,近几年对溪黄草展开了一系列的研究,发现其水提物及醋酸乙酯部
毒(HBV)抗原有抑制作用。
本研究正是基于以上的背景立题,在既往的工作基础上,深入探讨溪黄草之主流
品种,狭基线纹香茶菜的提取物,对免疫肝损伤小鼠的血清酶学及病理组织学的影响;
影响,及对TNF-Q、ICAM-1的上游信号分子Nit.KB的表达的影响。以阐明溪黄草
护肝作用的可能机制,并为将溪黄草开发为现代化的高效低毒的抗肝炎治疗药物提供
基础研究资料。
一溪黄草提取物对免疫肝损伤小鼠血清酶学及病理组织学检查的影响
目的:建立ConA诱导的免疫肝损伤模型,并在此基础上研究溪黄草提取物对免
疫肝损伤小鼠血清酶学及病理组织学的影响。方法:将Balb/cdx鼠于广州中医药大学
实验动物中心sPF级动物房适应性喂养三天后,随机分成5组:正常对照组,模型对照
组,阳性对照组(吡咯烷二硫代氨基甲酸盐,PDTC组),中药治疗组(溪黄草提取物
大、小剂量组)。从实验第1d开始,分别灌胃给予正常对照组、模型对照组及阳性对
照组无菌生理盐水,中药治疗大、小剂量组分别每日给予溪黄草提取物9.29/kg,
4.ag/kg,连续灌胃7d。各组除正常对照组、阳性对照组外,分别于第7d灌胃后半小时
尾静脉注射ConA
25m班g以造成免疫肝损伤模型,阳性药组在ConAtt射前半小时腹
腔注射PDTC
及进行肝脏病理组织学检查,并留取肝组织作相应处理后作RT—PcR及免疫组织化学
的检测。血清酶学及病理组织检查结果显示:(1)ConA能成功诱导小鼠产
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