分子遗传学6.pptVIP

延长因子EF-G有转位酶( translocase )活性，可结合并水解1分子GTP，促进核蛋白体向mRNA的3侧移动 。 fMet A U G 5 3 fMet Tu GTP 目 录 真核生物翻译的延伸 （二）肽链合成的终止 终止密码UAA,UGA,UAG； 在E.coli中释放因子（release factors（RF））; RF1识别UAA；RF2识别UGA和UAG。 这两种因子作用于A位点,且需要P位点的 肽酰-tRNA存在。 终止反应是释放因子识别终止位点并与之结合，激活肽基转移酶，水解了P位点上多肽与tRNA之间 的键，然后释放了多肽和tRNA。 在真核系统中只有一种释放因子——eEF可识别3种终止密码子。 原核肽链合成终止过程 肽链的终止 RF1：识别终止密码子UAA和UAG 终止因子 RF2：识别终止密码子UAA和UGA RF3：具GTP酶活性，刺激RF1和 RF2活性，协助肽链的释放 （原核生物） 真核生物只有一个终止因子（eRF） 无义突变：在蛋白质的结构基因中，一个核苷酸的改变可能使代表某个氨基酸的密码子变成终止密码子（UAG、UGA、UAA），使蛋白质合成提前终止，合成无功能的或无意义的多肽，这种突变就称为无义突变。 错义突变：由于结构基因中某个核甘酸的变化使一种氨基酸的密码子变为另一种氨基酸的密码子，这种基因突变叫错义突变。 GGA（甘氨酸） AGA（精氨酸） 无义突变 错义抑制 * 二、肽链的合成 原核细胞和真核细胞中各自的过程 （一）原核生物翻译起始 原核生物翻译起始因子 1.起始因子在细菌翻译中的作用 ⑴IF-3是30S亚基与mRNA起始位点的特 异结合所必须的。 ⑵IF-2是特异地和起始tRNA结合并把它 带到起始复合体中。 ⑶IF-1仅作为完整的起始复合物的一部分,可能和起始复合物的稳定性有关,而不是提供任何识别特异成份。 2.起始复合物的形成 (1) IF-3和核糖体30S rRNA结合 使16S RNA和mRNA的S-D序列结合 a.使30S 保持游离 b.形成起始复合体I (2) IF-2 + GTP + 氨酰甲硫氨酸 中间复合体II。 (3) IF-1置换出 IF-3, 50S亚基可和30S亚基合。 (4) 50S+30S 复合体III，释放IF-1、IF-2。 3.起始时mRNA和rRNA的碱基配对 原核30S小亚基和S-D顺序的结合 在细菌中被核糖体保护的DNA区域长35-40碱基长。有2个共同的特点: ⑴含有起始密码子AUG； ⑵有一个顺序和16SrRNA近3?端的顺序互补。 S-D序列：存在于mRNA上起始密码子上游约10bp以内，与带有IF-3的30S亚基的16SRNA互补结合的区域，因为澳大利亚的Shine和Dalgarno于1975年发现而得名。 翻译的起始 原核生物（细菌）为例： 所需成分： 30S小亚基、 50S大亚基、模板mRNA、 fMet-tRNAfMet、GTP、Mg2+ 翻译起始因子：IF-1、IF-2、IF-3、 IF-3 IF-1 翻译起始(翻译起始复合物形成)又可被分成3步： 1. 核蛋白体大小亚基分离 2、30S小亚基通过SD序列与mRNA模板相结合。 A U G 5 3 IF-3 IF-1 S-D序列 IF-3 IF-1 IF-2 GTP 3.在IF-2和GTP的帮助下， fMet-tRNAfMet进入小亚基的P位，tRNA上的反密码子与mRNA上的起始密码子配对。 A U G 5 3 IF-3 IF-1 IF-2 GTP GDP Pi 4、带有tRNA、mRNA和3个翻译起始因子的小亚基复合物与50S大亚基结合，GTP水解，释放翻译起始因子。 A U G 5 3 IF-3 IF-1 A U G 5 3 IF-2 GTP IF-2 -GTP GDP Pi 原核生物中，起始氨基酸是： 起始AA-tRNA是： 真核生物中，起始氨基酸是： 起始AA-tRNA是： 甲酰甲硫氨酸 fMet-tRNAfMet 甲硫氨酸 Met-tRNAMet （二）真核生物蛋白质合成的起始 1.真核生物蛋白质合成的起始因子 真核生物与原核生物起始机制的对比： （1）涉及的起始因子数目较多