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离体蛙心灌注及药物的影响 离体蛙心的制备 各处理因素对蛙心的作用及原理影响 无机离子：0.65％NaCl；2％CaCl2；1％KCl 药物：NA；Ach；阿托品；毒毛旋花子甙K 温度：低温林格液 酸、碱：NaHCO3 ；乳酸 【实验步骤】 离体蛙心的制备 仪器连接 实验计算机设置 实验观察、处理和记录 右主动脉弓 蛙心结构图 腹面 左主动脉弓 左心房 右心房 动脉圆锥 心室 背面 心室 左心房 房室沟 窦房沟 静脉窦 连接处 后腔静脉 右心房 蛙心结构图 1 2 4 3 穿线、插管 离体蛙心实验装置 2. MedLab实验参数设置 见P84表6-3 实验步骤 *实验时请调用“蛙心灌流”定制实验 *信号输入前先“调零” 离体蛙心实验装置 3.连接实验装置 实验步骤 * [教学要求] 掌握离体蛙心的制备方法和实验方法。 掌握多种因素对离体蛙心的影响和原理。 熟悉MedLab系统的实验记录和实验结果处理方法。 [实验相关知识] 1.维持心脏正常收缩的条件 多种因素对蛙心活动的影响 2.离体蛙心的特性 正 常蛙 心舒 缩 正常结构与 功 能 适 宜 的体液环境 适当的负 荷 正常的 神经支配 Na+ K+ H+ Ca2+ 温度PH ？ 去甲肾上腺素（NA) 乙酰胆碱(Ach) 阿托品 毒毛旋花子甙K 离体 林格液 改 变 离体蛙心的制备 仪器连接 MedLab参数设置（表6-3） 实验观察,处理和记录 [实验步骤] 蛙心暴露 结构辨认 穿线结扎和备用 插管和游离蛙心 腹 面 心室 左心房 右心房 动脉圆锥 左主动脉 弓 右主动脉 弓 背 面 静脉窦 后腔静脉 左前腔静 脉 右前腔静 脉 蛙心的正常解剖结构 心脏背面观 心脏腹面观 动作要轻柔，不要伤及静脉窦和传导组织。 切口位置要适当。 插管成功标志。 [插管注意事项] 仪器连接 注意事项： 换能器 插管液面高度 烧杯 调零 实验观察、处理和记录 1）观察和记录正常蛙心收缩曲线 (幅度，疏密度，规律性，基线) [实验步骤] 2） 观察无机离子的影响 ①等量 0.65％NaCl ②1～2滴 2% CaCl2 ③1～2滴 1% KCl 3）观察受体激动剂和拮抗剂的影响 ② 1滴 1:100,000 乙酰胆碱 ③ 1滴1:2,000 阿托品,观察 曲线变化，再滴入1滴Ach ① 1～2滴 1:10,000 去甲肾 上腺素 5）观察温度的影响 6）观察酸碱的影响 换入等量4℃的冷林格液 ① 1～2滴 2.5% NaHCO3 ② 1～2滴 3% 乳酸，出现 变化后，再加1-2滴 2.5% NaHCO3 4）观察强心苷类药物的影响 1滴0.025%毒毛幻花苷K溶液 图1 2.5%NaHCO3对蛙心收缩活动的影响 图2 先加3%乳酸再加2.5%NaHCO3对蛙心收缩活动的影响 [注意事项] 换液时蛙心插管内的液面应保持大致相同的高度。 林格液和药物交换时,所用吸管要用严格区分。 加药时先加1滴并注意观察,作用不明显时再补加, 作用一旦出现应立即换回新鲜的林格液。 施加处理因素前应先记录正常曲线，及时打标记。 [结果处理] 截取各种处理因素下有代表性的蛙心收缩曲线，用“画图”制成单页图打印出来。 1.等量 0.65% NaCl 2.1～2滴 2% CaCl2 3.1～2滴 1% KCl 收缩力下降 收缩力下降 4.1～2滴 去甲肾上腺素(NE) 5.1滴 乙酰胆碱（Ach） 总 结 收缩力增强 收缩力加强，HR加快 HR减慢，收缩力下降 6.1滴1:2,000 阿托品,观察曲线变化，再滴入Ach 7.1滴0.025%毒毛花苷K溶液 8.换入等量4℃的冷林格液 9.1～2滴 2.5% NaHCO3 总 结 HR加快 收缩力加强 收缩力减弱，HR减慢 收缩减弱 10.1～2滴 3% 乳酸，出现变化后，再加1-2滴2.5% NaHCO3 总 结 收缩力 减弱 [实验报告] 讨论: 分析各处理因素影响蛙心收缩的原理。 结论: 各处理因素对蛙心活动是何影响。 [预 习] 半数致死量的测定 生理科学实验的实验设计 林格液的成分（P15） NaCl KCl