基于量子点标记抗核抗体检测及其在Hep-2细胞中的免疫荧光成像.pdfVIP

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量三呈三窒堡堡垫丝堑竺竺!!里垒!!!兰塑塑!呈叁兰堡兰矍 基于量子点标记抗核抗体检测及在 Hep-2细胞中的免疫荧光成像 虞伟h,李晓军1.张宇2,罗冰1,房国祥1,白彩琴1.武建国1,顾宁2 (1.南京军区南京总医院解放军临床检验医学研究所.南京210002; 2.东南大学江苏省生物材料与器件重点实验室,南京210096) [摘要】 目的:对基于量子点(QIM55)标记抗核抗体(ANA)间接免疫荧光(IIFA)检测与细胞成像效果进行 ANA阳性血清产生的免疫夔光模式,单特异性ANA同时用免疫印迹法确认,并与FITC标记检测结果进行对 比分析。结果:Q0655标记荧光优先与细胞策内抗原-抗体反应.对阎期细胞核仁、着丝点与核均质型的染色 相对较弱.但在分霉【期细胞中,与FITC荧光标记所测核颗粒型与核均质型ANA蛄果趋近一致。在23倒ANA 阳性样本中QD标记共发现有15侧呈现胞浆内红色颗粒荧光.其中12例被证实分别舍有抗核糖体P蛋白、 AMA—M2或抗Jc-1等自身抗体.另有3倒胞策呈阳性的靶抗原性质不明.而FITC标记倪检测出9例呈现胞裳 内颗粒绿色荧光。基于相同的实验条件.FITC标记检出有10倒呈明显棱仁阳性.而QD标记住检出5倒,且 仅有部分比例的细胞核仁呈阳性反应。将QD655与F兀℃标记物联合应用.驯目基质片细胞所处周期不同而 致ANA阳性荧光掺八比倒存在一定差异.使得细胞核荧光染色存在不均一性.分别见有不同程度的亮黄色、 红黄色、黄绿色和绿色荧光染色。结论:QD655标记ANA间接免疫荧光检测是可行的,井具有方法敏感和实 验结果稳定的优点。与FITC标记联合应用将有助于区分和展示不同细胞周期桉内靶抗原分布厦可结合抗原- 抗体复合物量的盖异,井可有效时ANA水平作出合理评估。 【关键词】量子点;抗核抗体;间接免痘荧光实验;硫氰酸荧光素 of Basedon dots andimmuno-fluorescence quantumstaining imaging anti·nuclearin cells antibodyHep-2 删肌∥,12xiao.Junl,ZHANG掰,LUO口咖1, FANG Guo—Xian91,BAJCai一衄1,WUJian-Gu01,GUNi彤 of of InsdtlI}eClinical General (1.Research LaboratoryMedicine,PLA.NanjingHo叩ital ofBiomatefialsand N蛐jingCommand,N蛐jing210002,China;2.KeyLaboratory of devices Province。SourestUniversity,Nanjing210096,China) Jiangsu effectofcell of indirect evahatethe antinuclear by [Abstract]Objective:To ima西ng antlb0(1ies(ANA)tested immunoⅡuorescence Onquantum HEp-2cells∞expefi-

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