第六章 体外分析技术.ppt

非放射标记的免疫分析法 化学发光分析 时间分辨荧光分析 酶免疫分析 体外分析发展史 放射免疫分析定义:　　　 ( Radioimmunassay RIA ) 　　　 　　　 　　　 以放射性核素标记的配体(Ag*)为示踪剂,以配体(抗 原、激素结合蛋白等)和结合体（抗体、激素）的结合 反应为基础 ，在体外完成的微量生物活性物质的检测 技术。 分析原理 *Ag + Ab Ag + *Ag-Ab + *Ag Ag-Ab + Ag 条件： *Ag与Ag免疫活性相同 *Ag与Ab恒量 *Ag与Ag总量大于Ab有效结合位点 Ag*与Ag由于免疫化学性质一致，共同竞争性与Ab结合，当Ag*和Ab的量保持恒定，Ag*与Ag之和大于Ab时，则Ag*-Ab复合物的形成受Ag含量的制约，二者之间存在竟争抑制的函数关系，即随着Ag浓度的增加，Ag*-Ab复合物就减少，因为Ag*对Ab的结合被Ag竞争性抑制。根据这一函数关系的标准曲线，可求出被测抗原的含量 标准曲线 如果采用系列已知浓度的标准品在相同条件下进行分析，测得各标准点的结合率(B/(B+F))，以结合率对标准品量作图，可以得到一条标准曲线。通过这条标准曲线即可查得未知浓度的待测样品的含量。 B/(B+F) 已知Ag浓度