邻二氮菲分光光度法测铁.pptVIP

上一页 下一页 仪器分析实验 邻二氮菲分光光度法测铁 南华大学预防医学与放射卫生实验教学中心 教学对象：高等医学院校卫生检验专业学生 实验课时：6学时 课程类型：专业基础实验课 课程要求：必修 每组人数：2人 实验目的和意义 掌握分光光度法测定铁的原理和技术 熟悉分光光度法的条件控制和测定方案的拟定方法 了解分光光度计的使用方法 实验原理 在 pH 2-9 的溶液中，邻二氮菲能与 Fe2+ 反应生成稳定的配合物。 邻二氮菲 + Fe2+ → [邻二氮菲-Fe2+]配合物 （无色） （红色） 用分光光度计测定溶液吸光度，根据Beer 定律 A= K c 采用标准曲线法测定铁的含量。 常用测定方法： 直接进样－GC法 溶剂解吸－GC法 热解吸－GC法 PID－GC法 优点：简单，方便，费用低 缺点：采集后样品放置时间短 共同点：均用吸附剂 （活性碳，多孔聚合物）采集 样本，解吸后进样。采样样品稳定 时间较长，但采样率受采样 现场湿度影响较大； 解吸率有差异 特点： 前者：操作简便，不需特殊解吸仪器， 但检出限较高 后者：需热解吸仪，检出限降低100倍 PID为非破坏性检测器，常 用于便携式气相色谱仪 实验内容 1. 标准溶液的配制 2. 吸收光谱的测定和波长选择 3. 溶液吸光度的测定 4. 标准曲线的绘制 5. 样品含量的测定 6. 分析数据处理和结果计算 仪器 723 型分光光度计, 1 cm 比色杯 50 ml 容量瓶, 10 ml, 5 ml，2 ml 吸量管； 试剂 邻二氮菲溶液，醋酸钠溶液, 盐酸溶液, 氢氧化钠溶液, 盐酸羟胺溶液, 铁标准溶液。 (均为分析纯试剂) 问题：化学试剂按纯度可分为哪几类？分析化学应使用哪些？ 化学纯 (CP蓝色) ， 分析纯 (AR红色) 优级纯（CR深绿色 ) 专门用途高纯试剂，如：光谱纯、色谱 纯、电解纯等 测量条件 参比溶液：蒸馏水 波长扫描范围：400-700nm 比色杯厚度：1cm 测量波长：~510nm（参考值） 测量速度：快 50ml容量瓶 试剂加入 反应显色 测 定 实验步骤1 – 溶液配制 配制高、中、低三个样品 体积的溶液，选择吸光度适 中一种进行测定 按照浓度从小到大需要配制 6种溶液 标准溶液 样品溶液 1ml盐酸羟胺+5ml醋酸钠+3ml 邻二氮菲+加水至刻度 室温下静置反应30min 在分光光度计上进行，见后面 提问：除容量瓶之外还可以用什么？ 比色杯 加入溶液 选择波长 测 定 实验步骤2-测定吸光度 选择测量波长后， 作定波长下测定 用于选择测量波长，根据 吸收光谱中最大吸收波长选择 吸收光谱 吸光度测定 用溶液润洗，加入溶液体积不超过2/3 以最大吸收波长为测量波长 以蒸馏水为参比进行吸光度测定 提问：比色杯有几种类型和型号？ 操作步骤3-标准曲线绘制和样品测定 A c Ax cx 标准曲线绘制 样品测定 计算 A = a + b C A 为吸光度 a 为截距 b 为斜率 C 为浓度 注意事项 分光光度计测量前应预热30min。 仪器操作应在教师指导下进行。 手拿比色杯的粗糙面。 本实验的试剂加入顺序不能随意改变。 反应时间应严格控制足够长，保证反应完全。 测定顺序是从稀到浓。 仪器简介 上一页 下一页 仪器分析实验