生物总复习选修1专题4.ppt

解析：不溶于酒精溶液，但是细胞中的某些蛋白质则溶于酒精，利用这一原理，可以将DNA与蛋白质进一步地分离。 答案：C 走进实验室 基础再现 1.多聚酶链式反应（PCR）是一种体外迅速扩增DNA片段的技术，它能以极少量的DNA为模板，在几小时内复制出上百万份的DNA拷贝。被广泛地应用于遗传疾病的诊断、刑侦破案、古生物学、基因克隆和DNA序列测定等各方面。 实验课题：多聚酶链式反应扩增DNA片段 2.PCR技术 使DNA聚合酶能够从引物的3′端开始连接脱氧核苷酸 引物 参与的组成 在DNA复制中的作用 解旋酶 打开DNA双链 DNA母链 提供DNA复制的模板 4种脱氧核苷酸 合成子链的原料 DNA聚合酶 催化合成DNA子链 （1）细胞内参与DNA复制的各种组成成分及其作用 ①解旋酶：打开DNA双链。 ②DNA母链：提供DNA复制的模板。 ③4种脱氧核苷酸：合成子链的原料。 ④DNA聚合酶：催化合成DNA子链。 ⑤引物：使DNA聚合酶能够从引物的3′端开始连接脱氧核苷酸（引物是一小段DNA或RNA，它能与DNA母链的一段碱基序列互补配对。用于PCR的引物长度通常为20~30个核苷酸）。 （2）DNA的合成方向 DNA的两条链是反向平行的，通常将DNA的羟基末端称为3′端，而磷酸基团的末端称为5′端。DNA聚合酶不能从头开始合成DNA，而只能从3′端延伸DNA链，因此，DNA复制需要引物。当引物与DNA母链通过碱基互补配对结合后，DNA聚合酶就能从引物的3′端开始延伸DNA链，DNA的合成方向总是从子链的5′端向3′端延伸。 (3）在80~100 ℃的温度范围内，DNA的双螺旋结构将解体，双链分开，这个过程称为变性；当温度缓慢降低后，两条彼此分离的DNA链又会重新结合成双链。PCR利用了DNA的热变性原理，通过控制温度来控制双链的解聚与结合。 （3）在80~100 ℃的温度范围内，DNA的双螺旋结构将解体，双链分开，这个过程称为变性；当温度缓慢降低后，两条彼此分离的DNA链又会重新结合成双链。PCR利用了DNA的热变性原理，通过控制温度来控制双链的解聚与结合。 （4）TaqDNA聚合酶的应用，解决了高温导致DNA聚合酶失活的问题，促成了PCR技术的自动化；寻找目的菌株时，要根据它对生存环境的要求，到相应的环境中去寻找；实验室中微生物的筛选，是人为提供有利于目的菌株生长的条件，同时抑制或阻止其他微生物的生长。 （5）PCR反应的条件：稳定的缓冲液环境、DNA模板、分别于两条模板链结合的两种引物、四种脱氧核苷酸、耐热的DNA聚合酶、能严格控制温度变化的温控设备。 （6）PCR一般要经历三十多次循环，每次循环可以分为变性（９５ ℃）、复性（５５ ℃）和延伸（７２ ℃）三步。从第二轮循环开始，上一次循环的产物也作为模板参与反应。DNA聚合酶只能特异性地复制处于两个引物之间的DNA序列，使这段固定长度的序列呈指数扩增。 高考总复习.生物 高考总复习.生物 选修1 生物技术实践 专题4 DNA和蛋白质技术 考纲内容及能力要求 考向定位 1.了解DNA的物理化学性质和DNA的溶解性 2.二苯胺法鉴定DNA的方法和原理 3.掌握PCR技术的基本原理 4.能够掌握PCR实验操作中的主要步骤 5.了解PCR实验中每个步骤所发生的变化 6.熟练进行实验操作，掌握实验方法 1.PCR的反应过程 2.DNA的合成方向 3.PCR反应所需的实验条件 4.PCR反应缓冲液的组成成分 5.TaqDNA聚合酶的应用 6.PCR实验中的具体操作步骤和实验操作中的注意事项 7.PCR产物检测的方法 基础梳理 DNA的粗提取与鉴定 基础梳理 1.提取DNA的方法 提取生物大分子的基本思路是选用一定的__________ 或__________方法，分离具有不同__________或__________的生物大分子。对于DNA的粗提取而言，就是要利用DNA与_________、_________和__________等在物理和化学性质方面的差异，提取DNA，去除其他成分。 物理 化学 物理 化学性质 RNA 蛋白质 脂质 (1)DNA的溶解性DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度的氯化钠溶液中溶解度__________，利用这一特点，选择适当的盐浓度就能使DNA_________，而使杂质沉淀；或者使杂质__________，DNA被析出，以达到分离目的。 (2)DNA对酶、高温和洗涤剂的耐受性 蛋白酶能水解__________，但是对__________没有影响。大多数蛋白质不能忍受60~80℃的高温，而DNA在__________以上才会变性。洗涤剂能够瓦解__________，但对DNA