生物大分子相互作用分析技术(基础医学与医学实验技术)资料.pptVIP

* White-light (left) and fluorescence (right) photographs of a coral, Roatan, Honduras. Note the yellow-fluorescent area in the photograph on the right that is not evident in the other image. FRET技术能够对在固定细胞中的蛋白质相互作用或存在于活细胞内蛋白质间实时相互作用进行原位分析提供了唯一检测方式，能用于检测由于生物刺激引起的蛋白质相互作用变化。 直到不久前，分子细胞生物学家还只能依赖几种有限的技术手段解决特异蛋白质-蛋白质相互作用中的问题，这些技术都需要使用化学交联的试剂或抗体。但是，像免疫沉淀和亲和层析等此类技术中最大的难题，就是无法保留蛋白质在完整细胞中所具有的正常生理条件，而且，这些方法也无法提供相互作用蛋白质空间分布的信息。免疫细胞化学共定位可以给出两个特定蛋白质在同一细胞部位的间接证据，但是，同样无法直接说明这些特定蛋白质之间是否发生了相互作用。FRET测定则可以在完整细胞中解决这些问题。 FRET是指当供体（donor）的发射光谱与受体（acceptor）的吸收光谱相重叠，并且供体与受体间的距离在几个原子直径范围以内时，就会发生一种非放射性的能量转移。其原理是，以适当频率的