(二)多糖的纯化 方法多,根据条件适当选择,多种方法同时使用以达到理想的分离结果 1.分级沉淀法:乙醇分级沉淀分离各种硫酸软骨素。 2.季铵盐络合法: 表面活化剂与粘多糖聚阴离子形成络合物,水不溶。 3.离子交换层析: 利用pH及盐浓度梯度分离各种多糖 4.制备性区带电泳: 利用分子大小、形状、电荷区分 5.固定化凝集素的亲和层析法: 特异结合单糖和寡糖(可逆) 如刀豆凝集素ConA专一与甘露糖基结合。(半乳糖干扰素等) * (三)多糖的降解 制备低聚糖 1.化学降解法:常用亚硝酸控制降解法。污染 2.酶法降解:特异性强。 产量低,成本高 3.辐射降解法:使分子电离或激发,分子间形成化学键-辐射交联,导致分子链断裂-辐射降解。 四、多糖理化性质测定 (一)多糖的含量测定:方法多种 硫酸蒽酮法,硫酸苯酚法 (己糖基、戊醛糖、己糖醛酸) 硫酸卡唑法(糖醛酸) 乙酰丙酮显色法(氨基葡萄糖) (二)多糖纯度测定 1.电泳法(高压电泳) 2.凝胶柱层析法:呈现一个峰为标准 3.紫外扫描法:多糖200nm。纯度 4.其它方法:特殊基团,纸层析等 * (三)多糖分子量测定(物理方法
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