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荧光叶室讲解 基本原理 荧光发射的基本原理 荧光为什么能够反映光合表现? 叶绿素荧光与光合作用 光合电子传递链(Z链) 开放的反应中心和关闭的反应中心 荧光参数 LI – 6400光合荧光仪测定的参数直接测定荧光参数(一) F0:最小初始荧光,又称基底荧光或暗荧光。指经过充分暗适应的光合机构光系统II(PSII)反应中心全部开放时的叶绿素(Chl)荧光发射强度。 Fm:最大荧光。指经过充分暗适应的光合机构PSII反应中心完全关闭时的Chl荧光发射强度。 LI – 6400光合荧光仪测定的参数直接测定荧光参数(二) F0`:光下最小荧光。在光适应状态下PSII反应中心完全开放时的Chl荧光发射强度。为了使照光后所有的PSII反应中心迅速达到最大开放程度,在测定前先用远红光进行照射。 Fm`:光下最大荧光。在光适应状态下PSII反应中心完全关闭时的荧光发射强度。 Fs:稳态荧光。又称Ft。 LI – 6400光合荧光仪测定的参数间接计算荧光参数(一) Fv/Fm:光化学量子效率,指没有遭受任何环境胁迫并经过充分暗适应叶片,其PSII最大的(潜在)光化学量子效率。一般植物恒定在0.75 ~ 0.85。 也被称为开放的PSII反应中心的能量捕获效率。 Fv / Fm = (Fm – F0)/Fm Fv`/Fm`:光下开放的PSII反应中心的激发能捕获效率。 Fv`/Fm` =(Fm` - F0`)/Fm` LI – 6400光合荧光仪测定的参数间接计算荧光参数(二) ΦPSII:作用光存在时PSII实际的光化学量子效率,即PSII反应中心电荷分离实际量子效率,反映了被用于光化学途径激发能占进入PSII总激发能的比例,植物光合能力的一个重要指标。 ΦPSII =(Fm` - Fs)/Fm` ETR:电子传递速率。 ETR = PPFD ×ΦPSII × 0.84 ×0.5 LI – 6400光合荧光仪测定的参数间接计算荧光参数(三) qP:光化学淬灭系数。反映了PSII反应中心中开放 程 度,1 – qP则反映了反应中心关闭程度,反映了QA的还原程度。 qP =(Fm` - Fs)/(Fm` - F0`) NPQ:非光化学淬灭系数。反映了植物热耗散的能力的变化,数值范围在 0 ~ n (1,2,3,4,5 ……)。 NPQ =(Fm – Fm`)/Fm` = Fm/Fm` - 1 qN:非光化学淬灭系数。与NPQ相同,现在使用较少。数值范围为0 ~ 1。 qN = (Fm – Fm`) / (Fm – F0`) 荧光叶室的安装 使用镊子取下内置光量子传感器连接线。 排气管和热偶电极。 卸下四个螺丝,六个O形密封圈。 更换上下盖。 连接荧光叶室与分析器之间的电源连接线。 连接辅助连线。 白色密封圈的更换。 暗适应夹子的使用方法。 配置软件的安装。 软件介绍 基本实验 1、测量F0 Fm。 2、测量F0` 、Fm` Fs 。 3、测量ΦPSII、qP qN NPQ。 4、荧光和气体交换参数同时测量。 荧光测量的基本步骤 实验1: 植物暗适应状态的F0、Fm 、 Fv/Fm 打开一个文件(1,f1),输入文件名,添加备注。 设置测量光、饱和闪光(8,f2),保存设置。 夹好叶片。 等待dF/dt 绝对值 5或FlrCV% 1。 记录数据(按0,f1/f2/f3/f4)。 查看数据(1,f2)。 关闭文件(1,f3)。 传输文件(同光合操作)。 实验2: 植物光适应状态的F0`、Fm `、Fs、 Fv`/Fm` 打开一个文件(1,f1),输入文件名,添加备注。 设置测量光、饱和闪光和远红光(8,f2),保存设置。 设置活化光强度(8,f3)。 打开活化光(9,f4) 夹好叶片。 等待dF/dt 绝对值 5或FlrCV% 1。 记录数据(按0,f1/f2/f3/f4)。 查看数据(1,f2)。 关闭文件(1,f3)。 传输文件(同光合操作)。 实验3: 猝灭研究,测量ΦPSII、qP qN NPQ 1、打开一个文件(1,f1),输入文件名,添加备注。 2、设置测量光、饱和闪光和远红光(8,f2),保存设置。 3、设置活化光强度(8,f3)。 4、夹好暗适应好的叶片。 5、等待dF/dt 绝对值 5或FlrCV% 1。记录数据(按0,f1/f2/f3/f4)。 6、打开活化光(9,f4),等待植物适应光环境。 7、等待dF/dt 绝对值 5或FlrCV% 1。记录数据(按0,f1/f2/f3/f4)。 8、查看数据(1,f2),关闭文件(1,f3)。 9、传输文件(同光合操作)。 测量光的设置(8,f2) 饱和闪光的设置(8,f2) 远红光的设置(8,f2) 测
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