第三章免疫球蛋白教案分析.ppt

抗体(antibody, Ab)： B细胞识别抗原后增殖分化为浆细胞细胞所产生的一种蛋白质，主要存在于血清等体液中，能与相应抗原特异性地结合，具有免疫功能。 免疫球蛋白（immunoglobulin，Ig）： 具有抗体活性或化学结构与抗体相似的球蛋白。 第一节 免疫球蛋白的结构 一、免疫球蛋白的基本结构 四肽链基本结构（单体）： 2 H链(heavy chain) 2 L链(light chain) 二硫键连接 呈“Y”字形 氨基端（N端）和 羧基端（C端） （一）重链和氢链 H链： MW：50－75kD, 由450~550个aa残基组成。 分为可变区（V区）和恒定区（C区） L链： MW：25kD，由214个aa残基组成。 分为可变区（V区）和恒定区（C区） 恒定区（constant region, C区） 可变区（variable region, V区）： *H链和L链靠近N端约110个aa的序列变化很大，称V区。 重链可变区：VH 轻链可变区：VL 高变区(hypervariable region, HVR)或 互补决定区(complementary determining region, CDR)： VH 和VL区中各有三个区域的aa组成和排列顺序特别易变。 HVR1(CDR1), HVR2(CDR2), HVR3(CDR3) Ig抗原结合部位(antigen-binding site): VH 和VL的三个高变区共同组成。 骨架区(framework region, FR):高变区以外的区域。aa组成和排列顺序相对不易变化。FR1~FR4 Ig分类（classes）: 人类Ig根据其H链C区aa组成和排列顺序不同（抗原性不同），分为五类：IgG、IgA、IgM、IgD、IgE，其重链分别为：γ、α、μ、δ、ε。 亚类（subclasses）： 同一类Ig铰链区aa组成和重链二硫键的数目、位置不同，可分为不同的亚类： IgG: IgG1~IgG4 IgA: IgA1, IgA2 分型： 轻链可分为两型：κ、λ型 一个天然Ig分子上两条L链总是同型的。 五类Ig中，每类都可以有κ链或λ链，功能无差异。 不同种属，两条L链比例不同： 人血清Ig κ:λ=2:1, 小鼠κ:λ=20:1 免疫系统异常，比例有所改变。 亚型：根据恒定区个别aa差异，可分为?1、?2、?3、?4 （三）铰链区（hinge region）： *位于CH1与CH2之间，由十几个aa残基组成（脯aa及亲水性的aa残基）。 *易伸展弯曲（使抗体的两个抗原结合片段易与不同距离的抗原决定簇结合），易被蛋白酶水解。 二、Ig的功能区（结构域） *Ig分子的每条肽链折叠的几个球形单位，它们的功能不同，但结构相似。 *约由110个aa 残基组成，其aa序列相似或同源。 *L链：VL、CL H链：IgG、IgA、IgD: VH, CH1, CH2, CH3 IgM、IgE: VH, CH1, CH2, CH3, CH4 *Ig功能区的功能： ①VH和VL结合抗原，CDR与抗原表位互补； ②CH和CL上具有部分同种异型（allotype）的遗传标志 ③IgG的CH2和IgM的CH3具有补体C1q结合位点，可启动补体活化经典途径； ④IgG的CH3可结合细胞（单核细胞、巨噬细胞、中性粒细胞、 B细胞、NK细胞）表面的FcR（Fc?R）结合， IgE的CH2和CH3可与肥大细胞和嗜碱性粒细胞的IgE Fc 受体（Fc?R）结合。 三、Ig的水解片段 木瓜蛋白酶（papain）水解IgG： 部位：铰链区二硫键近N端 裂解片段： 2Fab（fragment antigen binding）： L+ VH+ CH1 1Fc（fragment crystallizable）： CH2 ＋ CH3 功能: Fab：结合抗原，单价 Fc：与效应分子及细胞结合； Ig同种型抗原性存在部位 胃蛋白酶(pepsin)水解IgG: 部位：铰链区二硫键近C端 裂解片段： 1F(ab’)2： （ L+ VH+ CH1）X2 pFc’ ： 小碎片 功能: F(ab’)2： 结合抗原，双价 pFc’ ：无生物学功能 水解片段的生物学意义：