谷氨酸棒杆菌L-天冬氨酸α-脱羧酶基因的克隆及其重组酶性质的研究.pdfVIP

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生物技术通报 ·研究报告· BIOTECHNOLOGY BULLETIN 年第 期 2013 4 谷氨酸棒杆菌 L-天冬氨酸 α-脱羧酶基因的克隆及 重组酶性质研究 璟 石增秀  崔文   周丽  周哲敏 (江南大学生物工程学院 工业生物技术教育部重点实验室,无锡 214122) 摘 要 : 从谷氨酸棒杆菌 ( )中克隆得到L-天冬氨酸α-脱羧酶基因 。将该基因连接到pET- Corynebacterium glutamicum panD 24a 载体上,并在Escherichia coli BL21 (DE3 )中实现了成功表达。蛋白电泳检测显示,PanD 自裂解后形成的α亚基和β亚基,即 PanD 重组酶具有自身加工功能。重组酶的比酶活高达2.60 U/mg (156 mmol/g ·h )。酶学性质研究表明,其最适温度为55 ℃,最适 pH 为7.0 。80 ℃条件下,PanD 的半衰期约为40 min 。在37 ℃,pH7.5 条件下, 值为4.26 mmol/L , 为35.97 nmol/min , 为1.02/s , K V k m max cat 催化效率kcat/Km 为0.24 L/mmol ·s。 关键词 : L-天冬氨酸α-脱羧酶 谷氨酸棒杆菌 表达 纯化 酶学性质 - -α- Cloning and Characterization of L aspartate decarboxylase from Corynebacterium glutamicum Shi Zengxiu Cui Wenjing Zhou Li Zhou Zhemin ( , , The Key Laboratory of Industrial Biotechnology of the Ministry of Education School of Biotechnology Jiangnan University ,Wuxi 214 122 ) Abstract:  L-aspartate-α-decarboxylase gene panD from Corynebacterium glutamicum was cloned and efficiently expre

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