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- 2016-05-14 发布于湖北
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吸附柱色谱分离技术 柱色谱分离特点 柱色谱分离与薄层色谱类似,是靠洗脱剂把分离的各组分逐个洗脱下来的过程,故也称洗脱色谱。 由于色谱柱填充的吸附剂的量远远大于薄层板,因而柱色谱可用于分离量比较大(克数量级)的物质。所以作为较大量样品的制备分离,柱色谱优于薄层色谱。 * 色谱分离技术在药物研究中具有重要意义 吸附柱色谱分离原理 ?利用欲分离的混合物中各组分分配在固定相和洗脱剂之间,被吸附的性质不同,而相互得以分离。 ?化合物被吸附作用越强,该化合物溶解在洗脱剂中越少,沿洗脱剂移动的距离则越小。反之,越多。 常压柱色谱 装柱 上样 洗脱 合并 1.装柱 ?所用吸附固定相一般为硅胶,氧化铝,粒度要求100-160目或160目以上。 ?吸附剂粒度越小,分离度越大,但洗脱速度越慢。 ?Rf值相差较大时,应用硅胶100-160目,可上样30mg/g硅胶,更多的情况下硅胶量为10mg/g硅胶(即分离1g 样品需要100g 硅胶)。 ?应用氧化铝时,粒度要求100-150目,分离1g样品需要20-50g氧化铝。 (1) 干法装柱 在柱子上端放一漏斗,直接加入硅胶。轻轻敲打层析柱,或上下震动层析柱,使填装均匀,再加一层石英砂,然后加入洗脱剂,使硅胶润湿。必要时加压或减压以除去气泡,加速溶剂化速度。 (2) 湿法装柱 将吸附剂硅胶与一定量溶剂调成悬浆状,快速倒入柱管中,打开活塞,使溶剂慢慢流出,吸附剂
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