实验一发酵罐的认知和使用.ppt.ppt

实验一 发酵罐的认识和使用 石陆娥 shilue@126.com 实验目的 了解发酵罐的构造 学习发酵罐的灭菌流程 掌握发酵相关的操作技术 发酵罐的构造 发酵罐由罐体、管路、主机及附属设备四部分组成 1）罐体 电机、泡沫电极、空气过滤器、空气前压力表、流量计、尾气管、尾气冷凝管、视窗、照明灯、夹套、温度电极、取样阀、罐底阀 2）管路 蒸汽 一路蒸汽进发酵罐夹套 二路蒸汽进发酵罐 三路蒸汽进取样管路 空气：进罐 水 一路进发酵罐夹套；电加热器、循环水泵、电磁阀 二路进排气管夹套 排气管 排污管 3）主机 电源开关、显示屏、加热指示灯、注水开关、搅拌开关、补料泵、电极线 4）附属设备 蒸汽发生器 空气压缩机 发酵罐的灭菌流程 一.空气管路的灭菌 空气管路上的除菌过滤器，使用蒸汽通过减压阀（空气减压阀不能进行蒸汽灭菌，所以空气预过滤器不灭菌）、蒸汽过滤器然后进入除菌过滤器。 空气除菌过滤器的滤芯不能承受高温高压，因此，将蒸汽减压阀调整在0.13MPa，不得超过0.15MPa。 空消过程中，除菌过滤器下端的排气阀应微微开启，排除冷凝水。 空消时间应持续30分钟左右，当设备初次使用或长期不用后启动时，最好采用间歇空消，即第一次空消后，隔3～5小时再空消一次，以便消除芽孢。 经空消后的过滤器，应通气吹干，约20～30分钟，然后将气路阀门关闭。保持空气管道正压。 三.发酵罐实消 实消是当罐内加入培养基后，用蒸汽对培养基进行灭菌的过程。 空消结束后，关闭进气阀门Q13,打开Q9卸去罐内压力，将校正好的PH、DO电极装好，尽快将配好的培养基从加料口加入罐内。 培养基在进罐之前，应先糊化，一般培养基的配方量应根据工艺要求确定，发酵液的最终容积为罐体全容积的70％左右计算(泡沫多的培养基为60％左右，泡沫少的培养基可达75～80％)，考虑到冷凝水和接种量因素，以及是否流加，初定容由生产根据工艺的要求自行决定，需在实践中摸索。 4.开启机械搅拌装置，低速转动，使罐内物料 均匀混合。 5.打开夹套排污阀Q22、蒸汽阀Q21，对罐内 培养基预热（采用夹套通汽预加热）。当罐内 温度升到90℃时（具体温度应按蒸汽质量而 变动），关闭夹套进汽阀Q21，关闭Q14，全 打开进汽阀Q12,打开Q13通入蒸汽，全开 Q18，微开Q19通过取样口向罐内通蒸汽，关 闭Q25、Q26，全开Q23,微开Q24向罐内通蒸 汽，微开尾气阀门Q9（三路通汽灭菌），关 闭电机搅拌。 6.当温度升到121—123℃，罐压升至 0.12MPa时，控制蒸汽阀门Q9、Q19、Q13、 Q24的开度，维持温度与罐压，并开始计时， 微开火焰接种口向外排蒸汽，当时间到达30 分钟之前，关紧焰接种口，关闭Q24（关闭前 应人为地开大蒸汽量几次，避免培养基残留于 阀门处）,关闭Q23，关闭Q19、18，关闭Q13、 Q12停止供汽。 7.关闭夹套排污阀门Q22，打开冷却水阀 Q27/DC1向夹套通水冷却，打开电机搅拌， 当压力降到0.05MPa时打开空气阀门Q14、 Q13向罐内通空气，加快冷却速度，并保持罐 压为0.05MPa，直到罐内培养基温度降至接种 温度。当罐内温度降至比发酵工艺所要求的温 度高2－3℃时，关闭阀门Q27/DC1停止通冷 却水。 发酵 1）温度降至发酵温度后，设置各发酵参数，溶氧电极校100% 2）火焰圈接种（罐压调小后再接种） 接种前应事先准备：酒精棉花、钳子、镊子、接种环、石棉网手套、Z字扳手。 菌种装入三角烧瓶内，接种量根据工艺要求确定。 将酒精棉花围在接种环周围点燃，将菌种瓶口在火焰上烧一会儿，用Z字扳手拧开接种口，迅速将菌种倒入罐内，此时应向罐内通气，使接种口有空气排出（压力接近与零，但不能为零）。 将接种口盖在火焰上灭菌后拧紧。接种后，罐压保持在0.03MPa~0.07MPa，调节通风量。 3）发酵初始化,用PH仪检测发酵液的PH值，然后校正PH；当系统接种完成后，把压力与流量调节好，系统则可以进入发酵模式，进行自动控制（温度、PH、DO），具体的工艺参数根据生产要求自己设定，系统将按设定好的参数可以进行自动控制或操作工手动控制。种子移入种子罐或发酵罐后控温培养，罐压一般0.03-0.05Mpa，转速根据工艺要求而定，调节循环水的温度控制发酵温度，当环境温度高于发酵温度时，用冷凝水降温；当培养基温度低于发酵温度时，用热水进行加热。PH、DO调节由控制系统通过执行机构自动加减实现。泡沫报警由泡沫探头检测泡沫信号在触摸屏以指示灯形式显示。 4）发酵结束，数据存盘 5）放料，清洗，关仪器。 注意事项 1.最高工作压力不大于0.2Mpa，进罐空气压力应不大于0.2M