中药化学第八章三帖类化合物要点.ppt

（3）Smith降解 水解不加热（低温加热），可得到完整结构的苷元。 如： （4）酶解 断裂苷键的条件比Smith降解更温和。酯皂苷易完全酶解出苷元。 (5)糖醛酸苷键的裂解 如： 四醋酸铅－醋酐法 三萜皂苷 全甲基化（保护羟基） 全甲基化皂苷 Pb(OAc)4,糖醛酸脱羧 脱羧甲基化皂苷 碱裂解苷键 完整苷元 微生物转化法： （6）酯苷键水解：酯苷键有酯键性质，可被碱加热水解 此法用苛性碱，条件剧烈，水解的糖易分解 此法水解可得到完整的糖，但酯苷键稳定的苷键难水解。 此法可定量的裂解寡糖、苷元或次级苷，且酰基取代不解离。十分有利于测定裂解产物的结构，并可裂解苷键稳定的三萜皂苷，现多用此法裂解酯苷键三萜皂苷。 三．溶血作用 绝大多数三萜皂苷水溶液能使血液中红细胞破裂而出现溶血： 少数三萜皂苷无溶血作用，甚至有抗溶血作用，如 酯皂苷苷元部分的酯键水解后失去溶血作用 三萜皂苷溶血作用强弱可用溶血指数表示。 溶血指数 一定温度，一定时间内，一定pH，同种红血球，等渗 等条件下，能使血液中红细胞全部溶血的三萜皂苷溶 液的最低浓度。 如： 甘草皂苷溶血指数为1:4000 测定三萜皂苷的溶血试验： 某些萜类（如三萜酸），胺类、脂肪酸、树脂和酸败的油脂类也可引起溶血，因此在进行溶血试验时要注意将三萜皂苷纯化后再做（胆甾醇沉淀，沉淀得到的甾体皂苷再作溶血试验）。 第四节　三萜类化合物的提取与分离 一、三萜类化合物的提取 1．醇类溶剂提取法 为提取皂苷首选方法 （1）含油脂高的原料可事先用石油醚脱脂以后再用醇提， （2）过滤时要趁热。 （3）也可用大孔树脂纯化，将皂苷水液通过大孔树脂柱，先用 水洗去部分糖和其它水溶性杂质，再用甲醇或乙醇进行梯度 （低～高）洗脱纯化（极性大的杂质留在柱上） 2．酸水解有机溶剂提取法 此法主要提苷元 注意： 1.事先可酶解后再酸水解。 2.要用TLC监测控制水解条件，防止异构化，以 及是否水解彻底。 先提总皂苷，再水解苷键，继用石油醚、苯、溶剂汽油、 CHCl3等弱极性有机溶剂提取苷元 3．碱水提取法 提取含羧基皂苷 二、三萜类化合物的分离 1．分段沉淀法 2．胆甾醇沉淀法 利用三萜皂苷能与胆甾醇生成不溶性分子复合物进行分离。 3．色谱分离法 一般要用色谱法才能拿到游离三萜及三萜皂苷单体 (1) 吸附色谱法 　吸附剂：硅胶 移动相：氯仿-丙酮、氯仿-甲醇或氯仿-甲醇-水等. (2) 分配色谱法 皂苷极性较大，难分离的皂苷可用分配色谱法进行分离。 支持剂：硅胶 固定相：3％草酸水溶液等 流动相：氯仿-甲醇-水、二氯甲烷-甲醇-水、乙酸乙酯-乙醇-水、 水饱和的正丁醇等。 反相柱：Rp-18、Rp-8或Rp-2 流动相：甲醇-水或乙腈-水等 也可用Rp-18、Rp-8等预制反相高效薄层板制备分离皂苷。 (3) 高效液相色谱法　 高效液相色谱法是目前分离皂苷类化合物效率最高的方法。 反相色谱柱，以甲醇-水、乙腈-水等系统为洗脱剂。 (4) 大孔树脂柱色谱 大孔树脂色谱近年用于精制和初步分离皂苷。 将含有皂苷的水溶液湿法上样，先用水洗涤除去糖和其他水溶性杂质，然后再用不同浓度的甲醇或乙醇依其浓度由低到高的顺序进行梯度洗脱。极性大的皂苷，可被10％～30％的甲醇或乙醇洗脱下来，极性小的皂苷，则被50％以上的甲醇或乙醇洗脱下来。 (5) 凝胶色谱法 Sephadex LH-20，不同浓度的甲醇、乙醇或水等溶剂洗脱分离 第五节 三萜类化合物的结构研究 一、UV光谱 齐墩果烷型三萜多具有双键(如Δ12),可用紫外光谱判断其双键类型 孤立双键 205～250nm 微弱吸收 α , β －不饱和羰基 242～250nm 异环共轭双烯 240、250、260nm 同环共轭双烯 285nm ? 18β －H构型 248～249nm 11-oxo，△12-齐墩果烷型 18α－H构型 242～243nm。 二、MS 1．游离三萜类化合物 多为烷烃结构，用EI