第八章病原性球菌的检验详解.pptVIP

思考题 1：金黄色葡萄球菌可产生哪些毒素和酶？ 2：金黄色葡萄球菌在B-P平板上的菌落特征如何，说明其原理。 3：金黄色葡萄球菌在血平板上的菌落特征如何，说明其原理。 4：确认葡萄球菌为金黄色葡萄球菌的依据至少应包括哪几个试验？ 5：金黄色葡萄球菌的形态与染色、培养特征如何？ 第二节 食品中溶血性链球菌的检验 一、概述 沙 志 金 链菌 二、生物学特性 （一）形态与染色： 1呈球形或卵圆形，直径0.5um-1um 链状排列（长短不一） 2 革兰氏染色阳性，衰老培养物常成阴性 3 无芽孢、无鞭毛、多数无夹膜 （二）培养特性 1、多数为需氧或兼性厌氧，少数为微需氧或专性厌氧 2、 对营养要求高，普通培养基不能良好生长，（需加血清液、腹水等） 3、最适温度37℃ PH7.4~7.6 4、在液体培养基中，溶血菌株,呈絮状或颗粒状沉淀生长（上清下浊）；不溶血菌球，均匀浑浊生长，如粪链菌。 5、在血平板上，形成灰白色，半透明、表面光滑、有乳光圆形突起的细小菌落，直径0.5—0.75mm，针尖大小，菌落周围出现溶血环。 链激酶：αβγα四种溶血。 (三)生化特性 1、均分糖葡萄糖产酸 2、对乳糖、甘露醇、水杨苷等的分解因菌株而异。 3、能使牛奶产酸而不凝固，不液化明胶、不分解菊糖（肺炎球菌分解葡萄糖） 4、 A群菌对杆菌肽敏感 （四）致病性链球菌可产生的毒素和酶 1、溶血素 2、致热外毒素 3、透明质酸酶 4、链激酶 5、链道酶 6、杀白细胞素 （五）抵抗力 60℃30min即被杀死，对常用消毒剂敏感 乙型链球菌对青霉素、红霉素、氯霉素、四环素、磺胺均敏感。 （六）链球菌分类 1、 按溶血能力分类： （1） 甲型（α）溶血性链球菌 （2）乙型（β）溶血性链球菌 （3） 丙型（γ）链球菌 2、按血清学分类 主要是根据链球菌细胞壁抗原进行分类，这种方法可靠，但工作复杂。 组抗原：用英文字母区分，共分18群：A B C D E F G H K L M N O P Q R S T 型抗原：用阿拉伯数字表示， 对人类致病的90%在A群中。 (七)流行病学与致病性（始） 溶血性链球菌在自然界中分布较广，存在于水、空气、尘埃、粪便及健康人和动物的口腔、鼻腔、咽喉中，可通过直接接触、空气飞沫传播或通过皮肤、粘膜伤口感染，被污染的食品如奶、肉、蛋及其制品也会对人类进行感染。上呼吸道感染患者、人畜化脓性感染部位常成为食品污染的污染源。一般来说，溶血性链球菌常通过以下途径污染食品： 　　1、食品加工或销售人员口腔、鼻腔、手、面部有化脓性炎症时造成食品的污染； 　　2、食品在加工前就已带菌、奶牛患化脓性乳腺炎或畜禽局部化脓时，其奶和肉尸某些部位污染； 　　3、熟食制品因包装不善而使食品受到污染。 溶血性链球菌常可引起皮肤、皮下组织的化脓性炎症、呼吸道感染、流行性咽炎的爆发性流行以及新生儿败血症、细菌性心内膜炎、猩红热和风湿热、肾小球肾炎等变态反应。 化脓性链球菌) 三、微生物检验 （一）检验程序 液体检样 固体检样→样品处理→增菌培养→分离培养→纯化培养→生化鉴定→报告 （二）检验操作要点 1、采样：食品：按常规 人体：咽拭 、血、尿 2、增菌培养： 葡萄糖肉浸液肉汤 一般情况 36±1℃ 24h 匹克氏肉汤：在污染严重时用 3、分离培养：血平板， 37℃ 24h,菌落:灰白色，半透明或不透明，表面光滑，有透明溶血环 4、分纯培养：血平板 37℃ 24h 5、镜检：革兰氏染色，阳性，G+链状排列，符合者可做生化鉴定。 6、生化鉴定： （1）链激酶试验（溶纤维蛋白酶试验） 吸取草酸钾血浆0.2mL， 加0.8mL灭菌生理盐水，混匀， 再加入链球菌18-24h36℃肉浸液肉汤培养物0.5mL及0.25%氯化钙0.25mL，混匀，置于36℃水浴10min, 血浆混合物自行凝固，观察凝块重新完全溶解的时间，完全溶解为阳性，如24h后不溶解即为阴性。同时用肉浸液肉汤做阴性对照，用已知的链激酶阳性的菌株做阳性对照。 （2）杆菌肽敏感试验 将分纯的乙型溶血性链球菌接种血平板，在划线处贴附杆菌肽纸片，37℃18h， 出现抑菌带为阳性，（可推测为乙型溶血性链球菌） 7、报告： 根据培养后的形态，菌落特征及生化试验可报告： 有乙型溶血性链球菌生长。 思考题： 1、链球菌的溶血现象有哪几个类型，各类型的溶血特征如何。 2、溶血性链球菌在血平板和葡萄糖肉汤中生长有何特征？ 3、溶血性链球菌能产生什么毒素和酶？ 4、写出链球菌的检验程序