第四章培养基解析.pptVIP

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第四节 培养基 例如,先在培养皿琼脂平板上测试某微生物的营养要求, 然后作摇瓶培养(shake culture)试验, 再进行台式发酵罐培养试验, 最后才扩大到试验型发酵罐和生产型发酵罐的规模。 二、培养基的种类 培养基——微生物的菜谱 名目繁多、种类各异 (一)按对培养基成分的了解作分类 天然培养基 组合培养基 半组合培养基 (二)按培养基外观的物理状态作分类 液体培养基 固体培养基 半固体培养基 脱水培养基 (三)按培养基对微生物的功能作分类 选择性培养基 鉴别性培养基 基础培养基 加富培养基 增殖培养基 三、培养基的配制 配料 溶解 调pH 过滤 分装 灭菌 包扎 摆斜面 贮存 本章小结 1. 微生物的六大营养要素 碳源、氮源、无机盐、能源、生长因子、水 2. 微生物的营养类型 按微生物所需碳源和能源的性质分为四大类: 化能异养微生物(最多) 化能自养微生物 光能异养微生物 光能自养微生物 3. 微生物的营养的方式 有细胞构造的微生物营养方式都是渗透营养型。 单纯扩散、促进扩散、主动运输和基团移位 4. 设计和配置培养基的原则和方法 4个原则: 目的明确、营养协调、理化适宜和经济节约 4个方法: 生态模拟、查阅文献、精心设计和试验比较 4. 培养基的种类 天然培养基、组合培养基和半组合培养基; 液体培养基、半固体培养基和固体培养基; 基础培养基、选择性培养基和鉴别培养基; 复习思考题 1. 设计表格,比较四种营养物质进入细胞的方式。 2. 对培养基的种类列表表示。 下节课再见了…… 是指寄生或共生的微生物, Eg.类支原体(MLO)、类立克次氏体(RLO)和少数寄生真菌等。 难养菌(fastidious microorganisms) 碳氮比(C/N)比: 碳源含量 氮源含量 碳氮比(C/N比)= 碳源中碳原子的摩尔数 氮源中氮原子的摩尔数 内源调节主要有以下两种方法: 第一种是采用磷酸缓冲液进行调节。 ① pH的内源调节 通过培养基内在成分所起的调节作用,就是pH的内源调节。 调节K2HPO4和KH2PO4两者浓度比可获得pH 6.0~7.6间的一系列稳定的pH。 [K2HPO4] [KH2PO4] =1时,溶液的pH稳定在6.8。 反应原理: K2HPO4+HCl→KH2PO4+KCl KH2PO4+KOH→K2HPO4+H2O 第二种以CaCO3作“备用碱”进行调节。 CaCO3(不溶于水又是沉淀性的,在培养基中分布不均匀)、NaHCO3均可用来调节培养基的pH。反应是: ② pH的外源调节 这是一类按实际需要不断从外界流加酸或碱液,以调整培养液的方法。 水活度定量涵义为:在同温同压下, 某溶液的蒸汽压 纯水蒸汽压 aw=该溶液的百分相对湿度值 (ERH,equilibrium relative humidity) aw 各种微生物生长繁殖范围的aw值在0.998~0.6之间。 back1 1.天然培养基 (complex media,undefined media) 这是指一些利用动、植物或微生物体或其提取物制成的培养基,这是一类营养成分既复杂又丰富、难以说出其确切化学组成的培养基。 例如,培养多种细菌的牛肉膏蛋白胨培养基, 培养酵母菌的麦芽汁培养基等。 天然培养基的优点: 营养丰富、种类多样、配制方便、价格低廉 。 缺点: 是成分不清楚、不稳定,不适宜做精细的科学实验。 2.组合培养基 (chemical defined media) 又称合成培养基或综合培养基(synthetic media),是一类按微生物的营养要求精确设计后用多种高纯化学试剂配制成的培养基。 例如,培养细菌的葡萄糖铵盐培养基, 培养放线菌的淀粉硝酸盐培养基(即高氏一号培养基), 培养真菌的蔗糖硝酸盐培养基(即察氏培养基)等。 组合培养基的优点: 成分精确、重演性高。 缺点: 价格较贵、配制较烦,且微生物生长比较一般。 3.半组合培养基(semi-defined media) 又称半合成培养基(semi-synthetic media),指一类主要以化学试剂配制,同时还加有某种或某些天然成分的培养基。 例如,培养真菌的马铃薯蔗糖培养基 等。 1.液体培养基(liquid media) 一类呈液体状态的培养基,在实验室和生产实践中用途广泛,尤其适用于大规模的培养微生物。 * * 如何给微生物做饭? 培养基(medium,复数media;或culture medium) 是指由人工配制的、适合微生物生长繁殖或产生代谢产物用的混合营养料。 碳源、氮源、无机盐、能源、生长因子、水 一、选用

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