第四章培养基已解析.pptVIP

第四章 培养基 第一节 概述 第二节 培养基的成分及来源 第三节 培养基的设计与优化 第四节 影响培养基质量的因素 第一节 概述 一、培养基的概念 1、培养基 是指人们提供微生物生长繁殖和生物合成各种代谢产物所需要的按一定比例配制的多种营养物质的混合物。 广义上讲培养基是一切可供微生物细胞生长繁殖所需的一组营养物质和原料。 同时培养基也为微生物提供除营养外的其它所必需的条件，工业生产上选择的培养基俗称发酵培养基，还应包括能够促进微生物合成产物所必须的成分。 2、培养基条件与微生物生理学和形态学的相关性 培养基的组成还可改善细胞的通透性。谷氨酸发酵中，生物素的用量影响谷氨酸产量，如果控制了生物素浓度在亚适量，就可以增加产生菌的细胞膜通透性，使谷氨酸连续分泌到细胞外，这就解除了谷氨酸对谷氨酸脱氢酶的反馈抑制作用，提高了谷氨酸的产量。青霉素能抑制革兰氏阳性菌细胞壁合成过程中肽聚糖交联，导致菌体细胞膨胀，亦可使谷氨酸易于泄漏到培养基中，提高谷氨酸产量。 培养基条件： 是指培养基组成、pH值、二价阳离子、阴离子聚合物、表面活性剂和固形物含量等。 3、配制工业发酵培养基时的一般要求 ①营养物质的组成比较丰富，浓度恰当，能满足菌种发芽和生长繁殖成大量的有生理功能的菌丝体之需要，更重要的是能显示出产物合成的潜力 ②在一定条件下，所采用的各种原材料彼此之间不能产生化学反应，理化性质相对稳定； ③粘度适中，具有适当的渗透压； ④要考虑所选用的原材料的品种和浓度与代谢产物生物合成过程中的调节关系，要利于主要产物的生物合成并能维持较长时间的最高生产速率，不需要的产物的合成速率降至最低 ⑤生产过程中，既不影响通气与搅拌的效果，又不影响或稍影响产物的分离精制和废物处理 ⑥选用的原材料尽量做到因地制宜，质优价廉，成本低。 二. 培养基的类型及功能 1. 按组成成分分类，分为合成培养基和天然培养基(复合培养基)。 合成培养基：由已知组成成分的各种营养物质组合的培养基，主要用于科学研究。所用的原料其化学成分明确、稳定，比如药用葡萄糖、硫酸铵、磷酸二氢钾等。 天然培养基：由一些组成成分不完全明确的天然产物如黄豆粉、蛋白胨等，与一些无机盐组合的培养基叫天然培养基（复合培养基或半合成培养基），常用于发酵生产。其特点是营养丰富、适于微生物的生长。 2. 按状态分类 固体培养基比较适合于菌种和孢子的培养和保存，也广泛应用于有子实体的真菌类，如香菇、白木耳等的生产。 半固体培养基是在配好的液体培养基中加入少量的琼脂，一般用量为0.5%～0.8%，培养基呈半固体状态，主要用于鉴定细菌、观察细菌运动特征等。 液体培养基80%～90%是水，其中含有可溶性的或不溶性的营养成分，是发酵工业大规模使用的培养基。 3. 按生产中的用途分类 孢子培养基是供菌种繁殖孢子的一种常用固体培养基，对这种培养基的要求是能使菌体迅速生长，产生较多优质的孢子，并且不易引起菌种发生变异。 种子培养基是供孢子发芽、生长和大量繁殖菌丝体，并使菌丝体长得粗壮，成为活力强的“种子”。营养成分应是易被菌体吸收利用的，同时要比较丰富与完整，其中氮源和维生素的含量应略高些，但总浓度以略稀薄为宜，以便菌体的生长繁殖。 发酵培养基是供菌体生长、繁殖和合成产物之用。它既要使种子接种后能迅速生长，达到一定的菌丝浓度，又要使长好的菌体能迅速合成所需产物。 第二节 培养基的成分及来源碳源、氮源、无机盐及微量元素、水、其它成分 1. 碳源 凡是用于构成微生物细胞和代谢产物中碳素的营养物质均称为碳源。生产中常用的碳源有糖类、油脂、有机酸、低碳醇和其它碳氢化合物等。 (1) 糖类主要有葡萄糖、蔗糖、糖蜜、淀粉糊精等。 (2) 油和脂肪也能被许多含有比较活跃的脂肪酶的微生物（如许多霉菌和放线菌）作为碳源和能源。 (3) 有机酸及其盐类，一些微生物对许多有机酸(如乳酸、柠檬酸、乙酸等)及其盐类有很强的氧化能力，因此有机酸和它们的盐也能作为微生物的碳源。 (4) 烃和醇类 近年来随着石油工业的发展，烷烃(石油裂解而得)用于有机酸、氨基酸、维生素、抗生素和酶制剂的工业发酵中。 甘油、甲醇、乙醇、山梨醇等也用于发酵碳源或生产某些单细胞蛋白。 酒精、简单的有机酸、烷烃等含碳物质也可作为碳源。 2. 氮源 氮源是指构成微生物细胞和代谢产物中的氮素的营养物质。 它是微生物发酵中使用的主要原料之一。其主要功能是构成微生物细胞和含氮的代谢产物，当培养基中碳源不足时，可作为补充碳源。 分为有机氮源和无机氮源。 （1）有机氮源 有机氮源有花生饼粉、黄豆饼粉（全脂、低脂和脱脂）、棉籽饼粉（低温榨取和高温榨取）、玉米浆（玉米淀粉的副产物，有干玉米浆和液态玉米浆）、玉米蛋白粉、蛋白胨、酵母粉、鱼