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(一)三联子密码及其破译 遗传密码 (genetic code): DNA(或mRNA)中核苷酸序列与蛋白质中氨基酸序列之间的对应关系。 密码子(codon): mRNA上每3个核苷酸破译成蛋白质多肽链上的一个氨基酸,这3个核苷酸就称为三联子密码。 翻译从起始密码子AUG开始,沿着5’→3’方向连续阅读密码子,直至终止密码子为止。 若以3个核苷酸代表一个氨基酸,有43=64种密码子,满足了编码20种氨基酸的需要。 遗传密码破译简史 (1)1954年Gamow首先对遗传密码进行了探讨; (2)1961年Crick 证明三联体密码子是正确的; (3)1961年,Nirenberg以均聚物、随机共聚物、特定序列的共聚物作模板合成多肽,破译遗传密码; (4)1964年Nirenberg 用核糖体结合技术研究遗传密码,直接测出三联体对应的氨基酸; (5)到1966年,遗传密码全部破译。 遗传密码的破译 核糖体结合技术 密码的简并性可以减少碱基突变造成的有害效应。 在标准遗传密码表中,只有一个密码子的氨基酸是Trp和Met。 mRNA:蛋白质的DNA序列信息的中间体。 tRNA:运送特定氨基酸到核糖体上合成蛋白质。 rRNA:核糖体的组成元件。 mRNA 原核生物mRNA与真核生物mRNA结构比较 多肽链合成的延长因子 磷酸化 由多种蛋白激酶催化 糖基化 糖基一般连接在4种氨基酸上,分为2种: O-连接的糖基化 与Ser、Thr和Hyp的-OH连接,连接的糖类为半乳糖或N-乙酰半乳糖. 在高尔基体上进行O-连接的糖基化. N-连接的糖基化 与Asn的NH2连接 在内质网上进行的为N-连接的糖基化 甲基化 由N-甲基转移酶催化 分子伴侣(molecular chaperone) 能够在细胞内辅助新生肽链正确折叠的蛋白质。是一类序列上没有相关性但有共同功能的保守性蛋白质。 按是否自发性折叠分为:热休克蛋白和伴侣素。 (一)抗生素 蛋白质的合成位点与功能位点常常被细胞内的膜所隔开,蛋白质需要运转。 核糖体是真核生物细胞内合成蛋白质的场所,任何时候都有许多蛋白质被输送到细胞质、细胞核、线粒体和内质网等各个部分,补充和更新细胞功能。 细胞各部分都有特定的蛋白质组分,蛋白质必须准确无误地定向运送才能保证生命活动的正常进行。 细胞中蛋白质的合成:绝大多数在细胞质中合成;一小部分在细胞器(叶绿体和线粒体)中合成。 定位于细胞器内的大部分蛋白质在细胞质中合成,细胞器内合成的留在细胞器内。 蛋白质插入或穿过生物膜的过程称为蛋白质运转(protein translocation)。 蛋白质运转的两种方式 翻译-运转同步 (co-translational translocation) ◆是即将进入内质网的蛋白质的易位方式; ◆蛋白质正合成的时候就可与运转装置结合; ◆蛋白质合成时,核糖体定位于内质网表面,称膜结合核糖体(membrane-bound ribosome)。 ◆分泌蛋白质大多是以同步机制运输的 ◆蛋白质翻译完成后从核糖体上释放,然后扩散至合适的靶膜并与运转装置结合。 ◆蛋白质合成时,其核糖体不与任何细胞器相连,称游离核糖体(free ribosome) ◆在细胞器发育过程中,由细胞质进入细胞器的蛋白质大多是以翻译后运转机制运输的。 ◆参与生物膜形成的蛋白质,依赖于上述两种不同的运转机制镶入膜内。 ??? ●信号序列特点: (1)一般带有10-15个疏水氨基酸; (2)在靠近该序列N-端常常有1个或数个带正电荷的氨基酸; (3)在其C-末端靠近蛋白酶切割位点处常常带有数个极性氨基酸,离切割位点最近的那个氨基酸往往带有很短的侧链(丙氨酸或甘氨酸)。 ●信号肽假说内容: (1)蛋白质合成起始首先合成信号肽 (2)SRP(信号识别蛋白)与信号肽结合,翻译暂停 (3)SRP与SRP受体结合,核糖体与膜结合,翻译重新开始 (4)信号肽进入膜结构 (5)蛋白质过膜,信号肽被切除,翻译继续进行 (6)蛋白质完全过膜,核糖体解离 信号肽与蛋白质转运的关系 (1)完整信号肽是保证蛋白质转运的必要条件; (2)仅有信号肽不足以保证蛋白质转运发生; (3)信号序列切除并不是转运所必需; (4)并非所有运转蛋白质都有可降解的信号肽。 前导肽及其特性:? 翻译后跨膜易位的蛋白质,前体一般含前导肽(leader peptide),前导肽在跨膜运转中起重要作用。? 过膜后,前导肽水解,蛋白质变为有功能的蛋白质。 叶绿体和线粒体中有许多蛋白质和酶是由细胞质提供的,其中绝大多数以翻译后运转机制进入细胞器内。 概 述
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