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(一)好氧培养 工业生产 液态:大型发酵罐。 固态:浅盘,深层通风。 三、培养微生物的一般方法 (二)厌氧培养 去除氧气。 通入其他气体(如二氧化碳、氮气等)。 厌氧罐 anaerobic jar 只保证厌氧菌在培养过程中处于良好无氧环境中。 厌氧手套箱 (三)分批培养 将菌种接入一定量的培养基中进行培养,最后一次性收获菌体或其代谢产物的培养方法。 (四)连续培养 恒化法连续培养 恒浊法连续培养 恒化器 恒浊器 控制菌体密度 控制培养液流速 以控制生长速率 恒浊器:根据培养器内微生物的生长密度,并借光电控制系统来控制培养液流速,以取得菌体密度高,生长速度恒定的微生物细胞的连续培养器。 恒化器:与恒浊器相反,是一种设法使培养液流速保持不变,并使微生物始终在低于其最高生长速率条件下进行生长繁殖的一种连续培养装置。 光电池 连续发酵缺点: 1、菌种易退化。 2、易污染杂菌。 3、营养物的利用率一般低于单批增大。 连续发酵的优点: 1、高效。 2、产品质量较稳定。 3、节约了大量动力、人力、水和蒸汽,且 使水、气、电的负荷均衡合理。 四、微生物纯种分离 (一)划线分离法 (二)涂布分离法 四、微生物纯种分离 (三)定量稀释分离法 四、微生物纯种分离 1ml 9ml 1ml 9ml 1ml 9ml (四)富集分离法 利用选择培养基 (五)单细胞分离法 利用特殊的显微操作仪 四、微生物纯种分离 思 考 题 1、微生物吸收营养物质的方式有哪几种,各有何特点? 2、什么叫基团移位?试述其分子机制。 3、什么是选择性培养基,试举一例并分析其中的原理。 4、简述水对生命活动的重要意义。 5、微生物的营养类型有哪几中,简述之。 6、名词解释 碳源、氮源、能源、生长因子、化能自养型、光能异养型、培养基、天然培养基、选择性培养基、鉴别性培养基 第四节 微生物的物质运输 被动扩散(Simple diffusion) 促进扩散(Facilitated diffusion) 主动运输(Active transport) 基团转位(Membrane vesicle transport) 大量运输 1、被动扩散 物质扩散的动力: 膜内外的浓度差。 特点: 不消耗能量。 不发生化学变化。 非特异性 仅依膜上小孔的大小和形状对被扩散的物质分子的大小和形状具有选择性。 被运输的物质是小分子量和脂溶性物,水,气体、甘油和某些离子。 2、促进扩散 借助膜上的载体蛋白,具有高度的立体专一性。载体蛋白能促进物质运输,但不能进行逆浓度梯度运输。 特点:需要特异性的载体蛋白;不消耗能量;可加快运输速度,但不能逆浓度运输。 3、主动运送 有特异性的载体蛋白参与。 需要消耗能量。 可以逆浓度梯度运输。 微生物的主要物质运输方式。 4、基团转位 是指一类既需特异性载体蛋白的参与,又耗能的一种物质运送方式。其特点是溶质在运送前后还会发生分子结构的变化,因此不同于一般的主动运送。 Enz3 葡萄糖通过基团移位运输过程的化学反应 1)PEP+HPr 酶I 磷酸~HPr + 丙酮酸 2)磷酸~HPr + 葡萄糖 6-磷酸葡萄糖 +HPr 酶II, 酶Ⅲ 基团转位示意图 甘露醇 甘露醇 5、膜泡运输 主要存在于原生动物特别是变形虫中。 如果膜泡中包含的是固体营养物质,称胞吞作用;是液体营养物质称胞饮作用。 第五节 微生物的培养 是人工配制的,适合于不同微生物生长繁殖或积累代谢产物用的营养基质。 培养基约有数千种。 一、培养基 (一)培养基的类型 1、根据营养物的来源 天然培养基 合成培养基 半合成培养基 2、根据培养基的物理性状 固体培养基 液体培养基 半固体培养基 3、根据培养基的用途 普通培养基 加富培养基 鉴别培养基 选择培养基 按营养物来源不同划分: 天然培养基:含有用化学成分还不清楚或化学成分不恒定的天然有机物制成的培养基。 合成培养基:化学成分完全了解的物质配制而成的培养基。 半合成培养基:主要以化学试剂配制,同时添加某些天然成分。 固体培养基:在液体培养基中加入一定量凝固剂,使其成为固体状态,琼脂含量一般为1.5%-2.0%。 应用:固体培养基常用来进行微生物的分离、鉴定、活菌计数及菌种保藏。 半固体培养基:琼脂含量一般为0.2%-0.7%。 应用:观察微生物的运动特征、分类鉴定及噬菌体效价滴定。 液体培养基:不加任何凝固剂
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