第三章微生物实验技术应用实例解析.ppt

* 防止金黄色葡萄球菌污染食品 　　防止带菌人群对各种食物的污染：定期对生产加工人员进行健康检查，患局部化脓性感染（如疥疮、手指化脓等）、上呼吸道感染（如鼻窦炎、化脓性肺炎、口腔疾病等）的人员要暂时停止其工作或调换岗位。 　　防止金黄色葡萄球菌对奶及其制品的污染：如牛奶厂要定期检查奶牛的乳房，不能挤用患化脓性乳腺炎的牛奶；奶挤出后，要迅速冷至-10℃以下，以防毒素生成、细菌繁殖。奶制品要以消毒牛奶为原料，注意低温保存。 　　对肉制品加工厂，患局部化脓感染的禽、畜尸体应除去病变部位，经高温或其他适当方式处理后进行加工生产。 防止金黄色葡萄球菌肠毒素的生成 　　应在低温和通风良好的条件下贮藏食物，以防肠毒素形成；在气温高的春夏季，食物置冷藏或通风阴凉地方也不应超过6小时，并且食用前要彻底加热。 为扩大检样中金黄色葡萄球菌的数量，提高阳性检出率，需进行增菌培养。因为金黄色葡萄球菌有耐受高盐的特性，因此采用7.5％氯化钠肉汤为增菌培养基。在这种培养基上除金黄色葡萄球菌和某些嗜高盐的海洋菌外，大多数其他细菌的生长都受到了高浓度氯化钠的抑制。 * 豆粉琼脂成分:牛心消化汤(PH7.4～7.6)　1000mL　琼脂　20g　黄豆粉浸液　50mL 制法:将琼脂加在牛心消化汤内，加热溶解，过滤。加入豌豆粉浸液，分装每瓶100mL，121℃高压灭菌15min。 豌豆粉浸液制法：取豌豆粉5g、氯化钠10g，加入蒸馏水100mL。置100℃水浴内加热1h，放于冰箱中过夜。吸取上清液即为豌豆浸液。 牛肉(或牛心)消化汤 成分　　绞碎牛肉(或牛心)　　　1000g　　15%氢氧化钠溶液　　　 27mL　　胰蛋白酶　　　　　　　40mL　　三氯甲烷　　　　　　　1mL　　氯化钠　　　　　　　　10g　　蒸馏水　　　　　　　　2000mL制法　　1　称取碎牛肉，加蒸馏水，隔水加热到80℃，维持15min。　　2　加氢氧化钠溶液，对pH试纸呈弱碱性，冷至40℃。　　3　加胰蛋白酶、氯仿，在36±1℃放置4～5h，每小时摇动一二次。　　4　4h后，吸取上层液5mL于试管中，加5%硫酸铜溶液0.1mL、4%氢氧化钠溶液5mL，混合之。若呈红色，则不须再消化，可由温箱取出。　　5　加入15%乙酸溶液45mL，对pH试纸呈酸性。　　6　煮沸15min，使胰蛋白酶破坏，冷后，放冰箱内一夜。　　7　次日吸取上层清液，加氯化钠10g，并加水补足原量，煮沸。　　8　校正pH7.4～7.6(加15%氢氧化钠溶液约10mL)，加热，用滤纸过滤，分装烧瓶，121℃高压灭菌20min。 注：①此培养基可作为琼脂培养基的基础，不需加蛋白胨。　　②胰蛋白酶之配制：称取去脂绞碎的猪胰500g，加入乙醇500mL、蒸馏水1500mL，混合之，装人玻塞瓶内。每日摇匀三次。3d后，用绒布过滤挤出其汁，加盐酸至0.05%，放冰箱内保存备用。 * 氯化锂英文名： Lithium chloride  * 新生霉素Novobiocin * 该试验用玻片法或试管法进行。以上为试管法。 结果观察：每隔半小时观察一次，连续观察6小时，出现凝固，即将小试管倾斜或倒置时，内容物不流动，判为阳性。同时做阴阳性对照。 * 牛肉(或牛心)消化汤 成分　　绞碎牛肉(或牛心)　　　1000g　　15%氢氧化钠溶液　　　 27mL　　胰蛋白酶　　　　　　　40mL　　三氯甲烷　　　　　　　1mL　　氯化钠　　　　　　　　10g　　蒸馏水　　　　　　　　2000mL制法　　1　称取碎牛肉，加蒸馏水，隔水加热到80℃，维持15min。　　2　加氢氧化钠溶液，对pH试纸呈弱碱性，冷至40℃。　　3　加胰蛋白酶、氯仿，在36±1℃放置4～5h，每小时摇动一二次。　　4　4h后，吸取上层液5mL于试管中，加5%硫酸铜溶液0.1mL、4%氢氧化钠溶液5mL，混合之。若呈红色，则不须再消化，可由温箱取出。　　5　加入15%乙酸溶液45mL，对pH试纸呈酸性。　　6　煮沸15min，使胰蛋白酶破坏，冷后，放冰箱内一夜。　　7　次日吸取上层清液，加氯化钠10g，并加水补足原量，煮沸。　　8　校正pH7.4～7.6(加15%氢氧化钠溶液约10mL)，加热，用滤纸过滤，分装烧瓶，121℃高压灭菌20min。 注：①此培养基可作为琼脂培养基的基础，不需加蛋白胨。　　②胰蛋白酶之配制：称取去脂绞碎的猪胰500g，加入乙醇500mL、蒸馏水1500mL，混合之，装人玻塞瓶内。每日摇匀三次。3d后，用绒布过滤挤出其汁，加盐酸至0.05%，放冰箱内保存备用。 * * Coagulase is an enzyme that catalyzes the formatio