第三章样品前处理技术解析.ppt

固相萃取流程 吸附柱的选择：根据待分离对象的特点选择合适的吸附柱。 活化吸附剂：萃取样品前用适当的溶剂淋洗固相柱。 加样：将已经浓缩后的样品采用适当溶剂溶解后加入到吸附小柱上。 洗去干扰杂质：选择合适的淋洗溶剂将干扰杂质先淋洗出小柱，农药保留在小柱中。 洗脱分析物：选择合适的淋洗溶剂将保留在小柱中的目标农药洗脱出来并收集。 影响萃取效率的因素 吸附剂选择：尽量选择与目标化合物极性相似的吸附剂。 淋洗剂选择：与目标化合物性质及吸附剂有关。 流速：样品溶液的流速一般不超过5mL/min。 固相萃取的优缺点 高的回收率和富集系数 不需要大量溶剂 萃取时间短（是液液萃取的1/2） 操作简单、快速、易实现自动化 缺点：复杂样品有时会堵塞填料空隙； 复杂样品的杂质干扰等 固相微萃取（SPME） SPME是在SPE基础上发展起来高效的样品预处理技术。它是利用固相提取的方法实现对样品的分离和净化，但所用的固相材料和分离机制不同。 SPME不是将待测物全部分离出来，而是通过残留农药在样品与固相涂层之间的平衡来达到分离目的。 其固相是一支覆盖着一层高聚物固定相（聚丙烯酸酯）的熔融石英纤维。浸入样品中，待测组分扩散吸附到石英纤维表面的涂层，当吸附平衡后，与GC或HPLC联用进行分析测定。 固相微萃取流程 吸附：萃取过程中应用磁力搅拌、超声振荡等方式，可缩短达到平衡的时间。 解吸：高温解吸（GC）或溶剂洗脱（HPLC） 纤维的老化和清洗：使用前都需要0.5-4h的老化。 固相微萃取的影响因素 固相涂层的性质：非极性固相涂层（聚二甲基硅氧烷）；极性固相涂层（聚丙烯酸酯） 液膜厚度：液膜越厚，吸附量越大，但平衡时间越长。 搅拌效率：有利于缩短平衡时间。 温度：有利于缩短平衡时间，但会减少吸附量。 盐的作用和溶液酸度：可改变被分离物质在水中的溶解度，提高灵敏度。 SPME的优缺点 操作时间短(一般只需15min，是液液萃取的30%) 操作简便 无需萃取溶剂 所需样品量少 适用范围广泛 缺点：石英纤维非常脆弱，易折断，重复性较差。 基质固相分散萃取（MSPD） MSPD是将样品与吸附填料（与SPE吸附材料一致）一起混合研磨，得到半干状态的混合物并将其作为填料装柱，然后用不同的溶剂淋洗柱子，将各种待测物洗脱下来。 反相吸附剂，如C8，C18，主要用来分离亲脂性物质 正相吸附剂，用于分离极性较大的农药 优点： 样品分析时间短 溶剂用量少 避免了样品均化、转溶、乳化等带来的损失 缺点： 取样量小造成检测限较高 杂质净化方面不如其他提取技术理想 QuEChERS 法 QuEChERS法是利用固相分散材料与样品或样品提取液充分接触，吸附其中的杂质而得到净化的目的，或者是利用固相吸附剂吸附目标分析物，再进行解析而净化。 其核心技术是净化材料或萃取剂能够选择性地吸附样品溶液中的目标化合物或干扰物质，以达到净化样品的目的，PSA 优点： 快速、简单、廉价、有效、可靠、安全（Quick, easy, cheap,effective, rugged and safe） 缺点： PSA价格较贵，不适合大批量农药残留的检测 浓缩倍数小，需要灵敏度高的检测仪器，如UPLC-MS-MS 免疫亲和层析（IAC） IAC是以抗原抗体中的一方作为配基，亲和吸附另一方的分离系统。是将抗体与惰性微珠（如，琼脂糖、纤维素）共价结合，然后装柱，将抗原溶液过免疫亲和柱，非目标化合物不保留，最后用洗脱缓冲液洗脱抗原，从而得到纯化的抗原。 免疫亲和层析流程 装填亲和层析柱 加样本 样本和抗体反应 洗去未结合的物质 再洗去疏松结合的物质 洗脱和抗体紧密结合的部分 免疫亲和柱的优缺点 特异性强、净化效率高 过程简单、统一 缺点： 载体价格昂贵 特异性抗体难得 凝胶渗透色谱（GPC） GPC又称为体积排阻色谱，是按溶质分子的大小进行分离的一种色谱技术。其原理是根据多孔凝胶对不同大小分子的排阻效应进行分离，样品中的大分子先被洗脱出来，小分子后被洗脱出来。 凝胶类型： 交联葡聚糖凝胶（Sephadex LH-20 ) 交联聚苯乙烯凝胶（Bio-Beads S-X）。 溶剂的选择：所选用的溶剂应该 对目标物有良好的溶解度，并对 凝胶有一定的膨胀力。 常用的洗脱溶剂有：二氯甲烷、 氯仿、乙酸乙酯、己烷等。 .