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转录因子的调控 卢铭辉 20110006015 1.核受体与其配体的结合促使胞质内手提与抑制性蛋白解离，受体转移到 细胞核并激活转录。 2.核受体与配体的结合可使核受体从转录阻遏物转变为激活因子。 3.激活因子的磷酸化使其与辅激活因子相互作用，激活转录。 4.转录因子泛素化可将其标记进行蛋白质水解，或激活其转录活性。 5.转录因子的SUMO化。 6.转录因子的甲基化。 7.转录激活因子的乙酰化。 辅激活因子 Roger Kornberg及其同事 体外转录实验出现压制（squelching）现象。 结论：存在某个因子为两种激活因子所必需的。 他们纯化出一种能解除激活因子压制作用酵母蛋白，称 之为中介物（mediator），并进一步通过实验直接证明出它有辅激活因子（coactivator）作用。 另外用中介物与酵母激活因子GCN4所做的实验与此结果一致 CBP 在前面我们学过：cAMP参与到真核生物转录激活的信号转导途径。 cAMP 激活蛋白激酶A（protein kinase A,PKA） CBP CREB本身就定位在细胞核，甚至在未磷酸化的情况下就能很多的结合 CRE. 体外转录中Sp1所需要的辅因子（cofactor required for Sp1 activation， CRSP） CBP的辅激活因子作用不只限于cAMP应答基因，CBP也适 于核受体应答基因，协助将核受体和基本转录装置联系在一 起。 需要另一家族的辅助因子，类固醇受体辅激活因子（steroid receptor coactivator SRC family）合作进行。 SRC能介导核受体与CBP的相互作用，同时还能召集 CARM1(辅激活因子相关精氨酸甲基转移酶)。 CBP还能作为辅激活因子作用另一种转录因子。 此外，CBP还具有很强的组蛋白乙酰转移酶活性，能将乙酰 基附加在组蛋白上。 组蛋白通常是基因活性的阻遏物，而组蛋白乙酰化可使其放 松与DNA的结合，解除转录抑制作用。 所以，激活因子与CBP在增强子上的结合，能使组蛋白乙酰 转移酶靠近增强子，使组蛋白乙酰化，从而激活临近的基因。 对辅激活因子的竞争（CBP/p300） CBP与p300都可以作为大量激活因子（CREB和核受体）的 辅激活因子，这表明CREB和核受体途径在利用相同的辅激 活因子时可能存在竞争作用。 Ronald Evans 发现CBP/p300的甲基化可以限制这种竞争作 用。 核受体 激活因子的泛素化 有时，被激活的基因会因激活因子的降解而失活。导致这种 降解现象的一个主要原因就是泛素化。 LIM同源结构域（LIM homeodomain，LIM-HD）家族的转录因子 RLIM结合CLIM 但，泛素化对激活因子也是有正效应的。 来自酵母的MET基因（合成含硫胺基酸合成必需基因）的转 录受到供体SAM（甲酰供体硫-腺苷甲硫氨酸）浓度的调控。 CSAM低时，MET基因被激活因子Met4激活；CSAM高时， Met4被一个包含泛素化的过程失活。 Met4被泛素化 另外，研究显示： 强转录因子更倾向于被泛素化调节，进而被蛋白酶体降解。 激活因子的SUMO修饰 SUMO修饰（sumoylation）是在目标蛋白的赖氨酸参加上附加1个或多 个拷贝的101个氨基酸的多肽SUMO（small ubiquitin-related modifier， 泛素相关修饰因子）。 该调控过程类似于泛素化，但SUMO修饰的激活因子不会被降解，而是 被送入特定细胞核区室中，保持稳定但不能与其靶基因作用。 PML（早幼粒细胞白血病） 激活因子的乙酰化 碱性蛋白质组蛋白与DNA结合可以抑制转录，组蛋白的赖氨 酸残基可被乙酰转移酶(HAT)乙酰化，从而减弱组蛋白的抑 制活性。 另外，HAT可是非组蛋白激活因子和阻遏物乙酰化，乙酰化 蛋白会对转录产生正向或负向调控。 信号转导途径 Thank! * 升高 进入细胞核 cAMP应答元件结合蛋白（CREB）磷酸化 cAMP应答元件 结合 开始转录 CREB结合蛋白（CREB-binding protein，CBP） CRE相连基因的激活模式 9个假定的亚基 水解，测序 CRSP有些亚基是独有的，但多数与已知的辅激活因子相同或至少同源。 不同辅激活因子可能是由其他各种辅激活因子的亚基重新混合组配而成。 核受体激活基因的激活模型 多种生长因子和细胞胁迫起始的级联事件 导致磷酸化以及一种分裂素激活蛋白激酶（MAPK）的激活 激活的MAPK进入细胞核并使激活因子发生磷酸化 激活因子利用CBP介导靶基因的激活，刺激细胞分裂