基因细胞内导入技术介绍.doc

《医用细胞工程》杨吉成等主编，2001年上海交通大学出版社出版 /department/gssu/netclass/yyxbgc/word2000/第21章 基因细胞内导入技术.doc DNA 采用分子生物学技术人工地导入细胞，观察它在细胞中的表达，研究其生物学特性和功能，这种把基因导入细胞中的技术称为基因转导 gent transfer 或称基因转移，也简称为导入。是研究基因表达、结构和功能的重要研究手段。 二 基因转导的种类： 目前基因转导技术很多，可根据研究目的、对象和实验条件加以选择。 1、染色体转导：将染色体 甚至是全套染色体 和分离提取的细胞核或DNA大分子片断，可采用细胞融合或细胞显微注射法将染色体或染色体片断导入细胞内并与受体细胞 或称宿主细胞 发生DNA整合，研究整合的细胞特性和功能，这种转导称为染色体转导，这项技术在细胞融合和单克隆抗体杂交瘤技术中已介绍，本章从略。 2、基因转导：将已克隆到的目的基因（或基因的DNA片断或序列），转导入离体细胞中进行表达的方法称基因转导，它有两类：一类是将目的基因转导入体外培养的细胞，另一类是导入从体内取出的细胞中，观察目的基因在细胞中表达，这项技术称基因转染 gene transfection 。 体外培养的人体细胞可以是已建立的细胞系 株 包括二倍体正常细胞。如同体内细胞，如淋巴细胞、LAK细胞、TIL细胞等，基因导入后