分光光度技术2.pptVIP

第二章 分光光度技术 分光光度技术 　分光光度技术(分光光度法)主要是指利用物质特有的光谱来鉴定物质性质及含量的技术，其理论依据是Lambert和Beer定律。 分光光度法是比色法的发展: 比色法只限于在可见光区，分光光度法则可以扩展到紫外光区和红外光区。比色法用的单色光是来自滤光片，谱带宽度从40－120nm，精度不高，分光光度法则要求近于真正单色光，其光谱带宽最大不超过3－5nm，在紫外区可到1nm以下，来自棱镜或光栅，具有较高的精度。 分光光度技术 基本原理 分光光度计 基本结构简介 分光光度技术的基本应用 分光光度法的误差 分光光度技术基本原理 一、光的基本知识 　　光是由光量子组成的，具有二重性，即不连续的微粒性和连续的波动性。波长和频率是光的波动性的特征，可用下式表示：　　　　　　　Ｃ 　　　　λ＝─── 　　　　　　　Ｖ 　　式中λ为波长，具有相同的振动相位的相邻两点间的距离叫波长。Ｖ为频率，即每秒钟振动次数。Ｃ为光速等于299770千米／秒。 光属于电磁波。 自然界中存在各种不同波长的电磁波，分光光度法所使用的光谱范围在200nm-10μ（1μ= 1, 000nm ）之间。其中200nm－400nm为紫外光区，400nm－760nm为可见光区，760nm－10,000nm为红外光区。 自然界的电磁波谱 自然界的电磁波谱 ①γ射线(γ-r