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(一)凝集反应 细菌和红细胞等颗粒性抗原,当与相应抗体特异结合后,在适量电解质存在的条件下,可逐渐聚集,出现肉眼可见的凝集现象称为凝集反应。 反应中的抗原称为凝集原,抗体称为凝集素. 在实际操作时,一般要稀释抗体。 具体的方法有直接法、间接法。 二、抗原、抗体间的主要反应 早在1896年,Widal就利用伤寒病人血清与伤寒杆菌发生特异性凝集的现象成功地诊断伤寒病。1900年Landsteiner在特异血凝现象的基础上发现了人类ABO血型,于1930年获得诺贝尔生理学和医学奖。一个世纪以来,这些经典的血清学方法一直沿用至今,并继续造福子人类。根据凝集反应的原理,以后又发展建立了各种间接凝集试验、间接凝集抑制试验以及固相免疫吸附血凝试验等新方法。 (二)沉淀反应 沉淀反应是指可溶性抗原(细菌培养滤液、细胞或组织的浸出液、血清蛋白等)与相应抗体在液相中特异结合后,形成的免疫复合物受电解质影响出现的沉淀现象。反应中的抗原称为沉淀原,可以是类脂、多糖或蛋白质等;抗体称为沉淀素。在操作时,一般要稀释抗原。 早在1897年,Kmus发现鼠疫杆菌的培养滤液能与相应抗血清发生沉淀反应。一个世纪以来,沉淀反应这一古老的经典抗原抗体反应,经过不断改进和发展,至今仍然是生物医学研究领域和临床检验工作中常用的、简便可靠的一种免疫学试验方法。就广义而言,目前广泛应用的各种高度灵敏和特异的标记免疫检测技术,如免疫荧光、放射免疫分析及酶免疫分析技术等,也都是在沉淀反应的基础上发展建立起来的。 经典方法 现代方法 环状沉淀反应 絮状沉淀反应 单向琼脂扩散法 双向琼脂扩散法 对流免疫电泳法 火箭电泳法 双向免疫电泳法 沉淀反应的主要方法 (三)补体结合试验:可用于检测未知抗体或抗原 (四)中和试验 中和试验是免疫学和病毒学中常用的一种抗原抗体反应试验方法,用以测定抗体,中和病毒感染性或细菌毒素的生物学效应。 凡能与病毒结合,使其失去感染力的抗体又称中和抗体。 能与细菌外毒素结合,中和其毒性作用的抗体称为抗毒素。 中和试验可以在敏感动物体内(包括鸡胚),体外组织(细胞)培养或试管内进行。观察特异性抗体能否保护易感的试验动物死亡,能否抑制病毒的细胞病变效应或中和毒素对细胞的毒作用;以及测定抗体的其他生物学效应。 第五节 生物免疫制品 人工自动免疫 人工被动免疫 常规疫苗 新型疫苗 疫苗(活疫苗、死疫苗) 类毒素 自身疫苗 亚单位疫苗 化学疫苗 多肽疫苗 基因工程疫苗 基因疫苗 抗抗体疫苗 特异性免疫治疗剂 免疫调节剂 抗毒素 抗病毒血清 抗菌血清 免疫球蛋白制剂 免疫核糖核酸 转移因子 白细胞介素 胸腺素等 1、侵袭力(invasiveness): 病原菌突破宿主防线,并能于宿主体内定居、繁殖、扩散的能力,称为侵袭力。 毒力,又称致病力。 表示病原体致病能力的强弱。 对细菌而言,包括吸附、侵入、定殖、扩散、抵抗、毒素等因素 (1)吸附和侵入能力: 细菌通过具有粘附能力的结构,如革兰氏阴性菌的菌毛,粘附于宿主的呼吸道、消化道及泌尿生殖道粘膜上皮细胞的相应受体,于局部繁殖,积聚毒力或继续侵入机体内部。 在原处生长繁殖并引起疾病: 霍乱弧菌 侵入细胞内生长繁殖并产生毒素,使细胞死亡,造成溃疡: 痢疾志贺氏菌 通过粘膜上皮细胞或细胞间质侵入表层下部组织或血液中进一步扩散: 溶血链球菌 淋病奈瑟氏球菌:菌毛可使其吸附于尿道粘膜上皮的表面而不被尿液冲走; 变异链球菌、乳杆菌:牙齿表面粘连成菌班,造成龋齿。 (2)繁殖与扩散能力 通过水解性酶类(透明质酸酶、胶原酶、链激酶等),使组织疏松、通透性增加,有利于病原菌扩散。 (3)对宿主防御机能的抵抗能力 a)细菌的荚膜和微荚膜具有抗吞噬和体液杀菌物质的能力,有助于病原菌于在体内存活,例如肺炎球菌的荚膜。 b)致病性葡萄球菌产生的血浆凝固酶有抗吞噬作用; c)分泌一些活性物质如溶血素,抑制白细胞的趋化作用; d)具抵抗在吞噬细胞内被杀死的能力,能在吞噬细胞内寄生; 2、毒素(toxin) 细菌毒素按其来源、性质和作用的不同: 外毒素、内毒素 病原细菌,主要是一些革兰氏阳性菌,在生长过程中合成并分泌到胞外的毒素,如破伤风痉挛毒素、白喉毒素等;也有存于胞内当细菌溶解后才释放的,如痢疾志贺菌的肠毒素。酶、酶蛋白、毒蛋白 (1)外毒素(exotoxin): 特点: 通常为蛋白质,抗原性强; 可选择作用于各自特定的组织器官; 不同病原菌产生的外毒素不同,所引起的症状也不同; 其毒性作用强,但毒性不稳定,对热和某些化学物质敏感。 类毒素(toxoid)和抗毒素(antitoxin): 利用外毒素对热和某些化学物质敏感的特点,用0.3-0.4%
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