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生物学案扩充资料 专题2 微生物的培养与应用课题 专题一 微生物的实验室培养 一、微生物：①原核生物界：例如细菌、蓝藻 ②真菌界：例如酵母菌 ③原生生物界：例如草履虫、变形虫、衣藻 ④病毒：例如艾滋病病毒、SARS病毒 二、细胞质：核糖体：蛋白质的合成场所。 质粒：小型环状DNA，含有抗药性基因、固氮基因、抗生素生成基因。 三、菌落的定义：是单个或少数细菌在固体培养基上大量繁殖，形成肉眼可见具有一定形态结构的子细胞群体。 思考1、培养乳酸杆菌时需要添加什么特殊物质？ 维生素 培养霉菌时需要将培养基pH调节为什么条件？ 酸性 培养细菌时需要将pH调节为什么条件？ 中性或微碱性 四、生长因子定义：某些微生物正常生长代谢过程中必须从培养基中吸收的微量有机小分子，如某些氨基酸、碱基、维生素等。（并不是所有微生物培养时都需要外源添加生长因子） 五、获得纯净培养物的关键（目的）是：防止外来杂菌的入侵 六、灭菌的方法：①灼烧灭菌法：用于接种环、接种针、试管的灭菌。 ②干热灭菌法：用于玻璃器皿等耐热器具的灭菌。 ③高压蒸汽灭菌法：用于培养基、无菌水等的灭菌。 七、平板冷凝后，为什么要将平板倒置？ 答：平板冷凝后，皿盖上会凝结水珠，凝固后的培养基表面的湿度也较高，将平板倒置，既可以使培养基表面的水分更好地挥发，又可以防止皿盖上的水珠落入培养基，造成污染。 八、在作第二次及其后的划线操作时，为什么总是从上一次划线的末端开始划线？ 答：划线后，线条末端细菌的数目比线条起始处要少，每次从上一次划线的末端开始，能使细菌的数目随着划线次数的增加而逐渐减少，最终得到由单个细菌繁殖而来的菌落。 九、比较平板划线法与稀释涂布平板法 平板划线法：⑴定义：通过接种环在固体培养基表面连续划线操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。 ⑵如何进行无菌操作？ ①对接种环、瓶(皿)口及时进行灼烧灭菌； ②迅速进行操作； ③将划线后的平板倒置。 稀释涂布平板法：⑴定义：将菌液进行一系列的梯度稀释后，分别涂布到固体培养基表面。稀释度足够高时，能培养出单个菌落。 如何进行无菌操作？①对涂布器、瓶(皿)口及时进行灼烧灭菌； ②吸管头不要接触任何物体； ③迅速进行操作。 思考2、培养12h和24h后，观察到的实验结果相同吗？如果不同，请分析产生差异的原因。 答：培养12h和24h后的菌落大小不同（相同、不同）；菌落分布位置相同（相同、不同）。原因是时间越长，菌落中细菌繁殖越多，菌落体积越大；菌落的位置不动，但菌落数增多。 生物学案扩充资料 专题2 微生物的培养与应用 课题2 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数 一、常见的一些选择培养基： ①加入青霉素的培养基，分离酵母菌、霉菌等真菌 ②加入高浓度食盐的培养基，分离金黄色葡萄球菌 ③不加碳源（有机物）的无碳培养基，分离自养型的微生物 ④不加氮源的无氮培养基，分离自生固氮菌 二、显微镜直接计数法：缺点：①不能区分死菌与活菌；②不适于对运动细菌的计数； ③需要相对高的细菌浓度； 思考1、利用稀释涂布平板法成功统计菌落数目的关键是什么？ 恰当的稀释倍数 设计对照实验组应遵循：①单一因素不同（自变量惟一）； ②其他因素（无关变量）相同且最适； ③观察并记录实验结果（因变量）。 思考2、如何设置对照实验排除培养基被杂菌污染？ 答：将未稀释涂布的空白平板与进行了稀释涂布的平板放在相同且适宜的条件下培养，观察是否有菌落生长。 四、鉴别培养基实例：分解尿素的细菌使加入了酚红的以尿素为唯一氮源的培养基变红。 五、鉴别培养基实例：大肠杆菌在伊红美篮培养基上形成黑色菌落。 生物学案扩充资料 IV 1、课题2是将土样制成细菌稀释液，直接涂布在以尿素为惟一氮源的选择培养基上，分离得到菌落 2、由于生物与环境的相互依存关系，在富含纤维素的环境中，纤维素分解菌的含量相对提高。 3、将滤纸埋在土壤中能使纤维素分解菌相对聚集（实际上是人工设置纤维素分解菌生存的适宜环境）；一般应将纸埋于深约10cm左右腐殖土壤中。 4、（1）选择培养基未加入凝固剂（琼脂）是液体培养基；鉴别培养基是固体培养基。 （2）有选择性；通过加入纤维素作为主要的碳源，选择出能分解纤维素的微生物。 （3）配制不含纤维素含其他碳源的培养基，用稀释涂布平板法培养纤维素分解菌，观察是否有菌落形成。 5、方法一：缺点是操作繁琐，加入刚果红溶液会使菌落之间发生混杂；优点是这样显示出的颜色反应基本上是纤维素分解菌的作用。 方法二：缺点是由于纤维素、琼脂和土豆汁中都含有淀粉类物质，可以使能够产生淀粉酶的微生物出现假阳性反应；优点是操作简便，不存在菌落混杂问题。 6、在选择培养的条件下，可以