食品安全热点物质的测定.ppt

1.感官识别法 饲喂盐酸克伦特罗比较严重的猪宰后肉色特别鲜红、后臀肌肉饱满突出，脂肪非常薄，而一般健康肉淡红色，肉质弹性好。 优点： 可以快速、简单、定性对动物性食品中有无瘦肉精作出初步判定，但主观性较强，可为消费者购买放心肉提供一定的参考。 2.化学分析法 §溶于水和乙醇，故可以用水进行提取 §芳香第一胺类的鉴别反应 §氯化物的鉴别反应 1.紫外可见分光度计 在243nm与296nm的波长出能得到最大的吸收 2.酸碱法（pH试纸） 正常新鲜肉用试纸测试其酸碱度多呈中性或弱碱性，宰后1h后，用pH试纸测得pH值为6.2—6.3，当在自然条件下冷却6h以上时pH值为5.6 —6.0，而含有盐酸克伦特罗的猪肉则偏酸性，pH值明显小于正常范围，所以酸碱度法也能测。 优点： 不需要昂贵的仪器与试剂，也无复杂的样品前处理，操作简单，但由于具有杂质干扰、灵敏度低、重现性差等缺点，只能作为初筛盐酸克伦特罗的方法； 4.色谱检测技术 色谱技术包括高效液相色谱法（HPLC）、气相色谱-质谱联用法（GC-MS）、气相色谱-傅里叶红外联用法（GC-FTIR）及薄层色谱法（TLC）等。目前，应用最多的是高效液相色谱法和气相色谱-质谱联用法。为了更准确的检测出瘦肉精，在这里我们主要介绍气相色谱-质谱联用法。 气相色谱-质谱联用法  ——固相萃取-气相色谱-质谱 对象：动物尿液 原理：对样品在pH=5.2的缓冲溶液中进行提取。 萃取的样液用C18和SCX小柱，固相萃取净化，分离的药物残留经过双三甲基硅基三氟乙酰胺（BSTFA）衍生后用带有质量选择检测器的气相色谱仪测定。 步骤：1.标准液的配制 2.尿样的提取，净化 3.衍生化、检测 4.计算 测定肉样中盐酸克伦特罗色谱图 色谱检测法： 检测精确度高 假阳性率低 费用较低 较高的灵敏度 重现性好 效率较高 准确度高 优点 色谱检测法： 仪器尚未普及 成本高 操作繁琐 缺点 5.生物传感技术 生物传感器是一门有多种学科互相渗透成长起来的新兴学科，已引起世界各国的重视。其原理为待测物与分子识别元件特异性的结合后，所产生的复合物（或光、热等）通过信号转换器转变为可以输出的电信号、光信号等，从而达到分析检测的目的。用它检测盐酸克伦特罗的原理与酶联免疫法几乎相同，只是将酶与底物反应的化学变化用换能器转化为电信号输出，从而可得待测物质的含量。 生物传感器简图 生物传感技术的优点： 具有选择性好、响应速度快、样品用量少、操作简易、价格低廉、定量准确，且其结构简单、体积小、携带和使用方便、可以实现连续的在线检测和反复使用等优点。 方法提要 试样中的克伦特罗、莱克多巴胺、沙丁醇胺和特布他林残留采用β-葡萄糖醛苷酶/芳基硫酸酯酶解，乙酸铵缓冲溶液提取，正己烷脱脂，水相溶液经混合型阳离子交换固相萃取柱净化，HPLC-MS/MS测定，内标法定量。 6.2 肌肉、内脏样品 从所提取全部样品中取出有代表性样品可食部分约500g，用组织捣碎机充分捣碎均匀，均分成两份，分别装入洁净容器中，密封，并标明标记，于-18℃以下冷冻存放。 6.3 牛奶、奶粉、牛骨汤精样品 从所取全部样品中取出有代表性样品约500g，充分混匀，均分成两份，分别装入洁净容器中，密封，并标明标记。牛奶样品于4 ℃以下避光保存；奶粉样品于常温下避光保存；牛骨汤精于-18 ℃以下冷冻存放。 7.1 提取 7.1.1 肌肉、内脏 称取5g试样，置于50mL 具螺旋盖的聚丙烯离心管中，添加50uL 同位素内标工作液，加入20mL 乙酸铵缓冲溶液，均质提取1min，然后加入40uL β-葡萄糖醛苷酶/芳基硫酸酯酶，充分震荡混匀，37 ℃酶解16h。4 ℃条件下8000r/min 离心5min，收集上清液与具螺旋盖的聚丙烯离心管中，加入20mL正己烷，震荡混匀。4 ℃条件下12000r/min离心5min，弃去正己烷层，水相溶液立即经滤纸过滤，并用2mL乙酸铵缓冲溶液洗涤滤纸，收集全部滤液，待净化。 7.1.2 牛奶、奶粉、牛骨汤精 称取5g试样，置于50mL 具螺旋盖的聚丙烯离心管中，添加50uL同位素内标工作液，加入20mL 乙酸铵缓冲溶液，涡旋混合1min，然后加入40uL β-葡萄糖醛苷酶/芳基硫酸酯酶，充分振荡混匀，37℃酶解16h。4℃条件下8000r/min 离心5min，收集上清液与具螺旋盖的聚丙烯离心管中，加入