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甘肃省会宁县第五中学高中生物选修一课件:专题2.1微生物的实验室培养
例2.下面对发酵工程中灭菌的理解不正确的是 A.防止杂菌污染 B.消灭杂菌 C.培养基和发酵设备都必须灭菌 D.灭菌必须在接种前 B 解析:灭菌是微生物发酵过程的一个重要环节。A说的是灭菌的目的,因为发酵所用的菌种大多是单一的纯种,整个发酵过程不能混入其他微生物(杂菌),所以是正确的;B是错误的,因为灭菌的目的是防止杂菌污染,但实际操作中不可能只消灭杂菌,而是消灭全部微生物。C是正确的,因为与发酵有关的所有设备和物质都要灭菌;发酵所用的微生物是灭菌后专门接种的,灭菌必须在接种前,如果接种后再灭菌就会把所接菌种也杀死。 编号 成分 含量 ① 粉状硫 10g ② (NH4)2SO4 0.4g ③ K2HPO4 4.0g ④ MgSO4 9.25g ⑤ FeSO4 0.5g ⑥ CaCl2 0.5g ⑦ H2O 100ml 例3.右表是某微生物培养基成分,请据此回答: (1)右表培养基可培养的微生物类型是 。 (2)若不慎将过量NaCl加入培养基中。 如不想浪费此培养基,可再加入 . 自养型微生物 含碳有机物 (3)若除去成分②,加入(CH2O),该培养基可用于培养 。 (4)表中营养成分共有 类。 (5)不论何种培养基,在各种成分都溶化后分装前,要进行的是 。 (6)右表中各成分重量确定的原则是 。 (7)若右表培养基用于菌种鉴定,应该增加的成分是 。 固氮微生物 3 调整pH 依微生物的生长需要确定 琼脂(或凝固剂) * 固体培养基:菌落,菌苔 半固体培养基: 无动力 有动力(弥散) (是否运动) 4.培养基的用途 液体培养基:增菌 固体培养基:纯化,增菌 半固体培养基:动力检测,保种 (二)无菌技术 1.无菌技术的概念 无菌操作泛指在培养微生物的操作中,所有防止杂菌污染的方法。无论是随后将要学到的倒平板、平板划线操作,还是平板稀释涂布法,其操作中的每一步都需要做到“无菌”,即防止杂菌污染。只有熟练、规范地进行无菌操作,才可能成功地培养微生物。 (1)消毒定义: 利用化学或物理方法,杀死大部份致病微生物的过程。区分为高程度消毒(High-level Disinfection)、中程度消毒(Intermediate-level Disinfection)、低程度消毒(Low-level Disinfection)三种方式。 2.消毒与灭菌的概念及两者的区别 (2)灭菌的定义: 以化学剂或物理方法消灭所有微生物,包括所有细菌的繁殖体、芽孢、霉菌及病毒,而达到完全无菌之过程。 灭菌与消毒技术是微生物有关工作中最普通也是最重要的技术。 1、煮沸消毒法:100℃煮沸5-6min 2、巴氏消毒法:70-75 ℃下煮30min或 80 ℃ 下煮15min 3、化学药剂消毒法:用75%酒精、新洁尔灭等进行皮肤消毒;氯气消毒水源 4、紫外线消毒 …… (1)消毒的方法: 3.常用的消毒与灭菌的方法 1、灼烧灭菌 2、干热灭菌:160-170 ℃下加热1-2h。 3、高压蒸气灭菌:100kPa、121 ℃下维持15-30min. (2)灭菌的方法: 最常用的灭菌方法是高压蒸汽灭菌,它可以杀灭所有的生物,包括最耐热的某些微生物的休眠体,同时可以基本保持培养基的营养成分不被破坏。 有些玻璃器皿也可采用高温干热灭菌。为了防止杂菌,特别是空气中的杂菌污染,试管及玻璃烧瓶都需采用适宜的塞子塞口,通常采用棉花塞,也可采用各种金属、塑料及硅胶帽,它们只可让空气通过,而空气中的其他微生物不能通过。 而平皿是由正反两平面板互扣而成,这种器具是专为防止空气中微生物的污染而设计的。 分类 定义 方法 灭菌法 杀灭一切微生物 物理法:热力、辐射、微波、等离子体 化学法:醛类、烷化剂 高效消毒法 杀灭一切致病微生物 紫外线、含氯剂、臭氧、复配剂等 中效消毒法 杀灭除芽孢外的致病微生物 超声波、碘类、醇类、酚类 低效消毒法 杀灭细菌繁殖体、亲脂病毒 单链季胺盐、双胍类、中草药、金属离子 无菌技术 3.微生物实验室培养的基本操作程序 1、器具的灭菌 2、培养基的配制 3、培养基的灭菌 4、倒平板 5、微生物接种 6、恒温箱中培养 7、菌种的保存 1.无菌技术除了用来防止实验室的培养物被其他外来微生物污染外,还有什么目的? 2.请你判断以
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