第10章 DNA复制.ppt

拓扑异构酶作用特点 既能水解 、又能连接磷酸二酯键 拓扑异构酶Ⅰ 拓扑异构酶Ⅱ 分 类 拓扑异构酶Ⅰ 切断DNA双链中一股链，使DNA解链旋转不致打结；适当时候封闭切口，DNA变为松弛状态。 反应不需ATP。 拓扑异构酶Ⅱ 切断DNA分子两股链，断端通过切口旋转使超螺旋松弛。 利用ATP供能，连接断端， DNA分子进入负超螺旋状态。 作用机制 五、DNA连接酶(DNA ligase) 　　连接DNA链3?-OH末端和相邻DNA链5?-P末端，使二者生成磷酸二酯键，从而把两段相邻的DNA链连接成一条完整的链。 ——缝合缺口 HO 5’ 3’ 3’ 5’ DNA连接酶 ATP ADP 5’ 3’ 5’ 3’ 在复制中起最后缝合缺口的作用。 在DNA修复、重组及剪接中也起缝合缺口作用。 也是基因工程的重要工具酶之一。 功能 DNA生物合成过程 The Process of DNA Replication 第三节 （一）复制的起始 　　需要解决两个问题： 　　1. DNA解开成单链，提供模板。 　　2. 合成引物，提供3?-OH末端。 一、原核生物的DNA生物合成 Dna A Dna B、 Dna C DNA拓扑异构酶 引物酶 SSB 3? 5? 3? 5? 3. 引发体和引物 含有解螺旋酶、DnaC蛋白、引物酶和DNA复制起始区域的复合结构称为引发体。 3? 5? 3? 5? 引物是由引物酶催化合成的短链RNA分子。 其功能是提供3?-OH 解链过程的打结现象由拓扑异构酶松解 引物 3 HO 5 引物酶 （二）复制的延长 复制的延长指在DNA-pol催化下，dNTP以dNMP的方式逐个加入引物或延长中的子链上，其化学本质是磷酸二酯键的不断生成。 5 3 5 dATP dGTP dTTP dCTP dTTP dGTP dATP dCTP OH 3 3 DNA-pol 复 制 过 程 动 画 原核生物基因是环状DNA，双向复制的复制片段在复制的终止点(ter)处汇合。 ori ter E.coli 82 32 ori ter SV40 50 0 （三）复制的终止 5? 5? 5? DNA-pol Ⅰ OH P 5? DNA-pol Ⅰ dNTP 5? 5? P ATP ADP+Pi 5? 5? DNA连接酶 随从链上不连续性片段的连接 逆转录 Reverse Transcription 第四节 逆转录酶(reverse transcriptase) 逆转录(reverse transcription) 逆转录酶 一、逆转录概念 河北大学医学部　张晶晶 * 中心法则 转录 翻译 复制 DNA RNA 蛋白质 逆转录 DNA的生物合成 (复制) 第 十 一 章 复制(replication) 是指遗传物质的传代，以母链DNA为模板合成子链DNA的过程。 复制 亲代DNA 子代DNA 复制的基本规律 第一节 复制的方式 —半保留复制(semi-conservative replication) 双向复制(bidirectional replcation) 半不连续复制(semi-discontinuous replication) DNA生物合成时，子代DNA，一股单链从亲代完整地接受过来，另一股单链则完全从新合成。两个子细胞的DNA都和亲代DNA碱基序列一致。这种复制方式称为半保留复制。 半保留复制的概念 一、半保留复制的实验依据和意义 按半保留复制方式，子代DNA与亲代DNA的碱基序列一致，即子代保留了亲代的全部遗传信息，体现了遗传的保守性。 半保留复制的意义 遗传的保守性，是物种稳定性的分子基础，但不是绝对的。 原核生物复制时，DNA从起始点(origin)向两个方向解链，形成两个延伸方向相反的复制叉，称为双向复制。 二、双向复制 origin 原核环状双链DNA及复制起始点 ori 真核生物每个染色体有多个起始点，是多复制子的复制。 习惯上把两个相邻起始点之间的距离定为一个复制子(replicon) 。复制子是独立完成复制的功能单位。 ori ori ori 真核线状双链DNA及复制起始点 复制子 3? 5? 3? 5? 解链方向 3′ 5′ 3′ 3′ 5′ 领头链 (leading strand) 随从链 (lagging strand) 三、复制的半不连续性 DNA复制的酶学 第二节 参与DNA复制的物质 底物(substrate): dATP, dGTP, dCTP, dTTP 聚合酶(polymerase