急性毒性试验分析.ppt

剂量 死亡数/动物数 50mg/kg 0/4 * 100mg/kg 2/4 200mg/kg 2/4 400mg/kg 4/4 * 800mg/kg 4/4 Dmax：当出现 4/4 死亡时,如前一组死亡率为2/4时 Dmax=4/4死亡剂量×1.4( )=400×1.4=560（mg/kg） Dmin：当出现 0/4 死亡时，如后一组死亡率大于1/4 Dmin =0/4死亡剂量÷1.4( )=50÷1.4≈35（mg/kg） 陈奇：《中药药理研究方法学》第3版 在确定了 Dmax和Dmin以后，可求得组间距（i 值 ): 以 Dmin 的对数为起点，向上推出 n 组动物的各组剂量的对数值，求出反对数即可求得各组的剂量。 i = log Dmax - log Dmin n - 1 求组间距（i 值 ): * * 四、剂量组数及动物数 LD50 测定中剂量组数的设计，除符合统计学要求外，还应根据预试验所提供的药物的毒性情况而定； 一般而言，在实际工作中设 4~5 个剂量组，剂距以 0.65~0.85 为宜； 小鼠每组 10 只 ( 雌雄各半 )，大鼠不应少于 6~8 只。 * * 五、剂型与给药 应写明受试药物的名称、批号、来源、纯度、保存条件及配制方法。 供试药品应能溶于或混悬于适当的溶媒，如果溶媒的毒性情况是未知的，则应设立一个溶媒对照组，溶媒对照组的给药容量应与最高剂量组相等。对所用溶媒及助溶剂须有详细记录，以备分析和审核。 给药途径要用2种，其中应包括推荐临床研究的给药途径。溶于水的药物应当测定静脉给药途径的急性毒性，口服药物应灌胃给药。 药物可以等体积（各剂量组的药物浓度不同）或等浓度（各剂量组的给药体积不同）给药，但必须注意上述两种方式给药所观察到的毒性效应可能是不尽相同的。 * * 五、剂型与给药 给药的体积，啮齿类动物口服给药的最大的体积，对非水溶液而言以不超过10ml/kg为宜，水溶液或混悬液一般不超过20ml/kg。如果剂量较大而不便于一次给药，可以分成相等的容量，每隔6~8小时给药，但必须在第一次给药后的24小时内完成。 口服给药应禁食；静注给药应注意药液的pH值、温度、渗透压、注射速度等可能影响毒效应的各种因素。 动物 给药途径 常用容量 最大容量 小鼠 ig 0.2ml/20g 1.0ml/20g iv 0.2ml/20g 0.5ml/20g ip 0.2ml/20g 1.0ml/20g sc 0.1ml/20g 0.5ml/20g im 0.1ml/20g 0.2ml/20g 表1-6 急性毒性试验常用动物单次给药的常用容量和最大容量 大鼠 ig 1.0ml/200g 3.0ml/200g iv 0.5ml/200g 1.0ml/200g ip 1.0ml/200g 3.0ml/200g sc 0.5ml/200g 1.0ml/200g 狗 im 0.2ml/200g 0.5ml/200g ig 10ml/只 20ml/只 iv 35ml/只 50ml/只 * * 六、试验时限与量限 急性毒性试验的观察时间取决于症状出现的时间、毒性强弱、致死速度、恢复速率以及药物本身的代谢特征等。 我国新药审批办法规定：急性毒性试验必须观察7~14 d，但一般不必超过2wk（14 d）。在表示药物的LD50 时最好同时注明观察时间，这样在毒性比较时，才会有共同的基础。 在实际工作中，对于毒性低的药物可用最大给药浓度和最大给药容量单次或24 h内分次给药，一般使用20只啮齿类动物，连续观察7~14 d，如无死亡出现，则该剂量即为药物的最大耐受剂量。 药液配制的具体步骤：等比稀释溶液：各小鼠给药容积一样=0.1ml/10g 预试中Dm=344mg/kg， Dn=141mg/kg，算出r=1.25，小鼠的平均体重为20g，每组10只，用药量为0.1ml/10g=10ml/kg C1=344mg/kg / 10ml/kg=34.4mg/ml 每组药液量=每组动物总重×用药量=200g×0.1ml/10g=2ml 1号 2号 3号 4号 5号 1号液 2号液 3号液 4号液 5号液 2ml 2ml 2ml 2ml 2ml 2ml 2ml 2ml 2ml * * 七、观察指标 目的：找出毒性作用的特征，初步获得药物毒效应的靶器官和受试动物的死亡原因。 内容： 笼边观察 特别要注意给药后