第1部分专题51DNA的粗提取与鉴定研讨.ppt

第一次加氯化钠后，必须充分晃动烧杯，使二者混合均匀，加速染色质中DNA与蛋白质分离，使DNA充分游离并溶解在氯化钠溶液中。第二次加氯化钠溶液也是为了DNA的再溶解，这时溶液中的蛋白质含量已很少。第三次加氯化钠溶液还是为溶解DNA。 点击进入 * * * * * * * * * * * * * * * * * * * 返回 第 1 部分 专 题 5 课题 1 理解教材新知 把握热点考向 应用创新演练 知识点一 知识点二 考向一 考向二 1.DNA在0.14 mol/L NaCl溶液中溶解度最低。 2．DNA不溶于酒精，但是细胞中的某些蛋 白质溶于酒精，可利用酒精将DNA和蛋 白质分开。 3．DNA对蛋白酶、高温和洗涤剂有耐受性。 4．在加热条件下，DNA遇二苯胺会被染成蓝色。 5．哺乳动物成熟的红细胞不含细胞核，不能作为提取DNA的实 验材料。若选取肝脏细胞或植物细胞，则必须充分研磨。 6．实验中加入柠檬酸钠的作用：作为抗凝剂，防止血液凝固。 [自读教材·夯基础] 1．原理 (1)DNA和蛋白质等其他成分在 溶液中溶解度不同，利用这一特点，选择适当的 就能使DNA充分溶解，而使 沉淀，或者相反，以达到分离目的。 (2)DNA不溶于酒精溶液，但是细胞中的某些蛋白质溶于酒精，这样可将DNA和蛋白质进一步分离。 不同浓度的NaCl 盐浓度 杂质 (3)DNA的鉴定：DNA＋ 。 二苯胺 蓝色 2．DNA的耐受性 (1)蛋白酶不能水解 ，能水解 。 (2)DNA在 变性，大多数蛋白质在 就可以变性。 (3)洗涤剂不能分解 ，但可以瓦解 。 DNA 蛋白质 80 ℃以上 60 ℃～ 80 ℃ DNA 细胞膜 如何将DNA进一步提纯？提纯后是否能得到纯净的DNA? 提示：利用DNA不溶于冷酒精，而蛋白质溶于冷酒精的原理进一步提纯DNA。提纯后的DNA中仍含有一定量杂质。 [跟随名师·解疑难] 溶解规律 2 mol/L NaCl溶液 0.14 mol/L NaCl溶液 DNA 溶解 析出 蛋白质 NaCl溶液浓度从2 mol/L降低的过程中，蛋白质溶解度逐渐增大 部分发生盐 析沉淀 溶解 DNA的溶解度 溶解规律 2 mol/L NaCl溶液 0.14 mol/L NaCl溶液 总结 ①DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同。在NaCl溶液浓度低于0.14 mol/L时，DNA的溶解度随NaCl溶液浓度的增加而逐渐降低；在0.14 mol/L时，DNA溶解度最小；当NaCl溶液浓度继续增加时，DNA的溶解度又逐渐增大 ②选择适当的盐浓度就能使DNA充分溶解，而使杂质沉淀，或者相反，以达到分离目的 [自读教材·夯基础] DNA含量相对较高 蒸馏水 洗涤剂 NaCl溶液 嫩肉粉 60 ℃～75 ℃ 木瓜蛋白 1．可否选用哺乳动物成熟红细胞作实验材料，为什么？ 提示：不可以，因为哺乳动物成熟红细胞无细胞核。 2．提纯时，为什么要选用体积分数为95%的冷酒精？ 提示：冷酒精提纯效果更好。 [跟随名师·解疑难] 1．实验材料的选取 (1)鸡血适宜作为实验材料的两个原因：一是因为鸡血细胞核中的DNA含量丰富，材料易得；二是因为鸡血细胞易吸水涨破。 (2)材料的处理(以鸡血为例)： 2.实验过程中的几点注意事项 (1)两次使用蒸馏水的作用：第一次用蒸馏水是使鸡血细胞吸水涨破，提取核DNA；第二次用蒸馏水稀释NaCl溶液，使DNA析出。 (2)实验中三次过滤操作的比较： 过滤次数 过滤目的 第一次 过滤核外物质，除去不溶的杂质 第二次 过滤除DNA外的其他核内物质