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水体初级生产力的测定 一、测定意义 水体初级生产力:指水生植物(主要是浮游植物)进行光合作用的强度。 1.是水中浮游植物生物量的指标 2.直接反映水体富营养化的程度 二、测定方法 Ⅰ 叶绿素a的测定 Ⅱ 黑白瓶法 Ⅰ 叶绿素a的测定 1、实验意义 叶绿素分为叶绿素a、b 、c, 是浮游植物的主要光和色素。其中, 叶绿素a 存在于所有的浮游植物中。测定叶绿素a含量,可表征浮游植物生物量,为测定初级生产力的一项重要指标。 2、测定原理 叶绿素a是有机物,不溶于水,但能溶于丙酮、乙醇等有机溶剂。通过机械方法使植物细胞破碎,用有机溶剂将叶绿素a从细胞中提取出来。使用分光光度计测叶绿素a的吸光度,最后利用公式计算叶绿素a的含量 Ⅰ 叶绿素a的测定 Ⅰ 叶绿素a的测定 3、仪器及设备 真空气泵 乙酸纤维滤膜 离心机 分光光度计 比色皿 离心管等 Ⅰ 叶绿素a的测定 4、测定方法和步骤 (1)水样的采集 采样300mL, 添加0.3ml 1% MgCO3防止悬液酸化 (2) 过滤水样:用乙酸纤维滤膜,真空抽滤装置过滤水样 (3)提取:抽滤完取下滤膜, 将滤膜夹在滤纸中放入-20 ℃ 冰箱中冷冻, 每隔30 min 取出在室温中解冻15min, 反复冻融3 次, 使细胞完全裂解以利于叶绿素a 的提取。将滤膜剪碎放入10 ml 具塞刻度离心管中, 加入新配制的90% 丙酮, 定容7-8ml。振荡1~ 2 min, 放入4℃ 冰箱中静置过夜。 5. 测定吸光度:将上清液在分光光度计上,用1cm光程的比色皿,分别读取?750nm、663nm、645nm、630nm波长的吸光度,并以90%的丙酮作空白测定吸光度 (4)离心:3500r/minrPmin离心15min, 将上清液移出到离心管,定容至10ml, 待测。 Ⅰ 叶绿素a的测定 四、计算方法 叶绿素a= V--水样体积(L) V1--定容体积(mL) D?--吸光度 δ--比色皿厚度(cm) Ⅰ 叶绿素a的测定 5、环境标准 叶绿索a含量(mg/m3) 营养类型 4 贫营养型 4~10 中营养型 10~50 富营养型 50 高度富营养型 指 标 贫营养 中营养 富营养 总N(mg/L) 0.1 0.1~0.3 0.3 总P(mg/L) 0.001 0.001~0.01 0.01 BOD(mg/L) 1 1~10 10 水色 蓝绿色 绿色 黄绿色 Ⅰ 叶绿素a的测定 Ⅱ 黑白瓶测氧法 植物和藻类通过光合作用,将太阳能转化为生物能,吸收二氧化碳,转化为有机物质,同时释放出氧气的过程。只要对比在同样时间内无光照的条件下的水中溶解氧的差异,就可算出植物光合作用形成的初级生产量。 Ⅱ 黑白瓶测氧法 一、测定原理 将几只注满水样的白瓶和黑瓶悬挂在采水深度处,曝光24小时,黑瓶中的浮游植物由于得不到光照只能进行呼吸作用,因此黑瓶中的溶解氧就会减少; 而白瓶完全曝露在光下,瓶中的浮游植物可进行光合作用,因此白瓶中的溶解氧量一般会增加。因此,通过黑白瓶间溶解氧量的变化,就可估算出水体的生产力。 C白 C黑 C原 Ⅱ 黑白瓶测氧法 二、测定方法和步骤 1. 采水与挂瓶 2. 溶解氧的固定与分析 曝光结束,立即取出黑瓶和白瓶,加入MnSO4和碱性碘化钾进行固定,充分摇匀后,测定溶氧量。 Ⅱ 黑白瓶测氧法 三、计算方法 各挂瓶水层日生产量(mgO2/L)的计算 总生产量=白瓶溶解氧一黑瓶溶解氧 净生产量=白瓶溶解氧一原始瓶溶解氧 呼吸量=原始瓶溶解氧一黑瓶溶解氧 毫克/升·日(mg/L·d) Ⅱ 黑白瓶测氧法 每平方米水柱日生产力的计算 水??层 (m) 1 m2水面下水层体积(L/m2) 每层段每升平均日?产量(mg/L) 每平方米水面下各水层日?生产量(mg/m2·d) 0.0~0.5 0.5~1.0 1.?0~2.0 2.0~3.0 3.0~4.0 0.0~4.0 Ⅱ 黑白瓶测氧法 四、质量保证与质量控制 五、环境标准 营养类型 最高日产量 gO2/m2 贫营养型和低产湖 0.5~1 中营养型 1~2.5 富营养型 2.5~7.5 高度富营养型 7.5
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