酶联免疫吸附测定法预案.ppt

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酶联免疫吸附测定法 ;基本原理 它采用抗原与抗体的特异反应将待测物与酶连接,然后通过酶与底物产生颜色反应,用于定量测定。测定的对象可以是抗体也可以是抗原。;;双抗体夹心法,属于非竞争结合测定。它是检测抗原最常用ELISA,适用于检测分子中具有至少两个抗原决定簇的多价抗原。 ? ?? ? 其基本工作原理是:利用连接于固相载体上的抗体和酶标抗体分别与样品中被检测抗原分子上两个抗原决定簇结合,形成固相抗体-抗原-酶标抗体免疫复合物。复合物的形成量与待测抗原的含量成正比。测定复合物中的酶作用于加入的底物后生成的有色物质量(OD值),即可确定待测抗原含量。 ? ?? ?;;实验器材和药品;;   酶结合物是酶与抗体或抗原联结的产物。具有酶促反应,显示出生物放大作用。在ELISA中,常用的酶为辣根过氧化物酶(horseradish peroxidase, HRP)和碱性磷 ???酶(alkaline phosohatase, AP)。;酶的底物;;;实验方法: ;DNM-9602G酶标分析仪

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