高级微生物期末试题探析.docVIP

y结合自己的专业，围绕一种微生物资源的开发，设计一种产品，说明理由，产品的技术方案，及质量标准。 SFTVS重组活载体疫苗 发热伴血小板减少综合征病毒(SFTSV)是近年在我国新发现的一种布尼亚 病毒,病人的主要症状为发热、血小板减少、白细胞减少、消化道症状和多脏器 功能损伤。目前已在河南、湖北、山东、江苏、安徽、辽宁等16个省发现发热 伴血小板减少综合征(SFTS)病例,病人平均死亡率在10%左右。目前尚没有 有效的疫苗可以使用,研制安全有效的预防用疫苗成为了应对SFTS疫情的迫切 需要。 重组活载体疫苗是利用微生物做载体，将保护性抗原基因重组到微生物体中，使用能表达保护性抗原基因的重组微生物制成的疫苗。 优点：疫苗多为活疫苗，重组体用量少，抗原不需纯化，载体本身可发挥佐剂效应增强免疫效果 一、疫苗制备 第一步是分离目的基因，获得目的DNA片段的方法主要有两种，一是直接从细胞基因组中分离，二是人工合成。 ?第二步是将DNA片段和载体在体外连接重组，成为重组DNA分子，多采用连接酶的方法连接。 第三步是基因克隆，即将重组体DNA分子转入大肠杆菌中增殖。 第四步是目的基因克隆的筛选与鉴定，即从大量携带重组体DNA分子的细胞中分离出带目的基因的细胞。 1）在含有一定浓度抗生素的选择培养基上筛选 2）酶切鉴定， 3——）PCR鉴定，测序分析 第五步是目的基因诱导表达 6、SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳及western blot 分析 二、质量标准试验 1、蛋白浓度的测定（采用BCA蛋白定量试剂盒测定浓度） 2、抗原 含量的测定（ELISA） 3、无菌检查： 判定标准：自接种肉汤培养基之日起观察 14 天，接种样品培养基无 杂菌，判定为合格，如有杂菌，复试。复试样品量应加倍。无杂菌生长判 为合格。若复试仍有杂菌生长，判为不合格 5宿主细胞细胞 DNA 残留量 6细菌内毒素含量 7 pH 值 8 鉴别试验（采用双抗体夹心酶联免疫法） 2.2.14 外观 灯检法。 2.2.15 装量 2.2.17 异常毒性试验 8重组活载体疫苗的免疫效力实验 9病毒滴度 一）、重组活载体疫苗的小鼠免疫与攻毒保护试验及攻毒剂量试验 1、疫苗免疫小鼠 2、小鼠体重变化监测 3、攻毒保护实验 4、攻毒后肺滴度的测定 5、免疫小鼠抗体和小鼠细胞因子检测 二）疫苗抗原与SFTSV血凝抑制试验血清的特异性反应的检测（ELISA） 四）产品抗原性、免疫原性和动物试验保护性的分析 5) 动物过敏性试验 7、疫苗免疫持续期，和疫苗保存期检测 针对你设计的产品，如果要申请知识产权保护其核心竞争力，你认为应该从哪些角度进行申请，主要目的是什么。如何保证你申请的知识产权能够被授权 产品发明专利， 发热伴血小板出血热疫苗发明，目前尚无发热伴血小板减少综合征疫苗。 外观改进，申请外观设计专利 可以实验方法的改进上，申请实用新型专利。 申请专利目的：?其一，通过法定程序确定发明创造的权利归属关系，从而有效保护发明创造成果，独占市场，以此换取最大的经济利益，及时申请专利就是要防止其发明创造成果被他人随意使用，丧失其应有的价值。 ?????其二，及时申请专利是为了在市场竞争中争取主动，防止竞争对手将相同的发明创造申请专利，从而确保自身产品生产与销售的安全可靠性。 三、多角度申请专利可以增加申请的知识产权被授权的可能性 如何保证你申请的知识产权能够被授权 二、将帮助 HYPERLINK /s?wd=%E4%B8%93%E5%88%A9ie=gbktn=SE_hldp00990_u6vqbx10 \t _blank 专利代理人更好的起草 HYPERLINK /s?wd=%E4%B8%93%E5%88%A9%E6%96%87%E4%BB%B6ie=gbktn=SE_hldp00990_u6vqbx10 \t _blank 专利文件。可以评价 HYPERLINK /s?wd=%E4%B8%93%E5%88%A9ie=gbktn=SE_hldp00990_u6vqbx10 \t _blank 专利申请获得授权的可能性。　　据国外 HYPERLINK /s?wd=%E4%B8%93%E5%88%A9ie=gbktn=SE_hldp00990_u6vqbx10 \t _blank 专利机构调查，有66%以上的发明专利最后不能获得授权，其中绝大多数都是因为存在在先公开的文献，缺乏新颖性而致。　　二、将帮助 HYPERLINK /s?wd=%E4%B8%93%E5%88%A9ie=gbktn=SE_hldp00990_u6vqbx10 \t _blank 专利代理人更好的起草 HYPERLINK /s?wd=%E4%B8%93%E5%88%A9%