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动物细胞融合与
单克隆抗体;一、动物细胞融合;(一)动物细胞融合的概念;⑴.原理:;(三)动物细胞融合技术的应用;抗体的传统生产方法; 单克隆抗体的制备—极富创造性的方案
将能够产生特定抗体的B淋巴细胞和具有无限增殖能力的骨髓瘤细胞融合在一起,形成杂交瘤细胞。杂交瘤细胞既能大量增殖,又能持续分泌成分单一的特异性抗体。这种单一类型的只针对某一特定抗原决定簇的抗体分子,就是单克隆抗体。
米尔斯坦(英国)和科勒(德国)因此在1984年获诺贝尔奖。;;动物特异性免疫
分离B淋巴细胞(B);找到骨髓瘤细胞(G)。注意B淋巴细胞是一个系列。(B1,B2,B3,---Bn)
细胞融合——三种融合方式:(BB;BG;GG)
第一次筛选:在“选择培养基培养”上培养筛选杂交瘤细胞
第二次筛选:在“多孔培养板上”培养杂交瘤细胞系列 ,每孔只放一个杂交瘤细胞。“克隆化培养”每个杂交瘤细胞,并进行“单一抗体检测”,“检测阳性”的孔内即是所需要的杂交瘤细胞。
选择所需要的杂交瘤克隆细胞群,体外培养或注射到小鼠腹腔内增殖。提取单克隆抗体。
;已知细胞合成DNA有D和S两条途径,其中D途径能被氨基嘌呤阻断。人淋巴细胞中有这两种DNA的合成途径,但一般不分裂增殖。鼠骨髓瘤细胞中尽管没有S途径,但能不断分裂增殖,将这两种细胞在试管中混合,加聚乙二醇促融,获得杂种细胞。请回答:
(1)试管中除融合的杂种细胞外,还有 种融合细胞。
(2)设计一方法(不考虑机械方法),从培养液中分离出
杂种细胞,并说原理。
方法: 。
原理:;3)为何要进行两次筛选?;(1)作为诊断试剂:在临床生化诊断、病理组织定位、体内肿瘤的定位等,与常规抗体相比,具有准确、高效、简易、快速特点.
(2)用于治疗疾病和运载药物:
主要用于癌症治疗。
生物导弹:抗癌细胞的单克隆抗体+放射性同位素+化学药物或细胞毒素。(单克隆抗体:导向。准确找到癌细胞位置,原位杀死癌细胞。)
;; 单抗制备过程分哪几步?请用箭头把以下代表单克隆抗体制备过程步骤的图解??字母按正确顺序连接起来。顺序是? ;B;小结; 细胞;植物体细胞杂交、动物细胞融合的比较;
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