第三章 薄层色谱(6h).ppt

第三章 薄层色谱法 ;薄层色谱的优点： ①设备简单，操作方便。 ②快速。 ③可以利用腐蚀性的显色剂（浓硫酸、浓盐酸、浓磷酸等）。 ④薄层色谱可以广泛地选用各种固定相，比纸上色谱有显著的灵活性。它又可以广泛地选用各种移动相，此点比气相色谱有利。 ⑤薄层色谱比纸色谱的检出灵敏度高。 ⑥薄层色谱适于分析小量样品（一般几到几十微克，甚至小到上述的10-11克），但是也适用于大型制备。 ⑦技术的多样化，一方面有多种展开方式（如双向展开，多次展开，分步展开，连续展开，浓度梯度展开等）。另一方面，可以应用不同的物理化学原理（如吸附色谱，离子交换色谱，薄层电泳，薄层等电聚焦法等）。 ⑧与气相色谱比较起来，薄层色谱法更适于分析热不稳定，难于挥发的样品。但是它不适于分析挥发样品。 然而TLC也有它的不足，目前TLC的自动化程度不及气相色谱法和高效液相色谱法，并且分离效果也不及后两者，因此成分太复杂的混合物样品，用薄层色谱法分离或分析还是有困难的。 ;近年来薄层色谱法又有了新的发展，例如，固定液的化学键合固定相薄层、多孔有机高分子小球薄层以及金属铝箔板电解法阳极氧化制取氧化铝薄板等，特别是极细粒度（微米数量级）的吸附薄层板，为提高速度（十几秒钟可分离几个组分）和灵敏度方面开辟了新方向。在定量方面的双光束薄层扫描仪已有商品出售，为薄层色谱法自动化精确定量方面提供了发展可能。 ;第一节基本原理 薄层色谱法可以有多种形式：如吸附色谱，分配色谱，离子交换色谱等，而应用最广泛的是吸附薄层色谱，所以在这里只讨论吸附薄层色谱。 吸附色谱原理为利用混合物各组分对吸附剂吸附力不同而将各组分分离。 ;吸附作用力可分为物理吸附和化学吸附两大类型。 物理吸附的特点为：吸附作用力为分子间的一般作用力，即范德华力，没有化学键的生成与破坏。因之物理吸附具有普遍性，无选择性；吸附速度快而可逆；同时吸附热较小（5~10千卡/摩尔）；被吸附分子不限于单层，实际上可以是多层。 化学吸附的特点是：吸附作用力除一般分子间的范德华力外，还有??似化学键力；即电子的转移或电子共用等。由于被吸附分子与吸附剂分子间有成键的可能，所以有选择性，吸附速度较慢，需要在高温下才能发生；不易解吸；吸附热较大（10~100千卡/摩尔），被吸附分子一般是单层的。 物理吸附与化学吸附可以并行发生，二者不是截然无关的。;在吸附色谱过程中，溶质、溶剂和吸附剂三者是相互联系而又相互竞争的，如此构成了整个层析分离过程 。 在薄层吸附色谱过程中，主要为物理吸附，无选择性。因之吸附剂与多元组分溶液接触时，一方面任何溶质都可被吸附（当然单位重量吸附剂所能吸附物质的量，即“吸附量”会因物质种类而异），另一方面，吸附剂也可吸附流动相分子。由于物理吸附是可逆的，故被吸附的分子同时也可被解吸出来。;在吸附过程中，溶质分子与溶剂分子对吸附剂表面位置可以相互竞争；溶剂分子可以顶替已吸附的溶质分子，而溶质分子也可顶替被吸附了的溶剂分子；此竞争过程可用下式表示：;吸附等温曲线;当条件改变时，平衡就遭到破坏。如加入一定量溶剂时，此过程左移，然后建立新的平衡。在吸附色谱过程中，展开剂（溶剂）是不断供给的，所以在原点上溶质与展开剂间的平衡就不断遭到破坏，即吸附在原点上的溶质不断被解吸，而被解吸出来的溶质分子溶于展开剂中向前移动，遇到新的吸附剂表面，溶质分子与溶剂分子又会在新的吸附剂表面上建立新的平衡。但随着展开剂的不断加入，平衡又会受到不断移动上来的展开剂之破坏，因而又会有一部分溶质分子被解吸亦随展开剂向前移动，如此吸附——解吸——吸附的交替过程就构成了吸附色谱法的分离基础。吸附力较弱的溶质分子首先被展开剂解吸并推向前去，而吸附力较强的溶质分子则解吸较慢，并被推前不远，如此不同组分因对吸附剂吸附力之差异而被分离开来。 ;由于吸附薄层色谱中一般溶质分子对吸附剂的吸附力比溶剂分子为高，可见，溶剂推移速度要比溶质快，故通常把溶质与溶剂移动之速度比称比移值（Rf）： 溶质移动速度 溶质移动距离 Rf = = 展开剂移动速度 展开剂移动距离 显然，在给定条件下，比移值Rf对某一溶质来讲是一个特征值，吸附力强的溶质，有较小的Rf值，反之，则有较大的Rf值。Rf这一特征值就构成了色谱分析的基础。;溶质对吸附剂吸附力的强弱与溶质分子结构有密切关系，一般说来，随物质分子中双键，叁键尤其是共轭键的增加，以及分子量的增加，吸附力也将增加。芳烃的吸附能力大于脂肪烃；不饱和烃，脂肪烃的吸附能力随分子量增大而增加；芳族化合物中