生化实验--血糖的测定概念.pptx

血糖的测定;正常人空腹血糖浓度是多少？ 为何能保持恒定？ 糖尿病 ;正常人空腹血糖浓度(fasting plasma glucose,FPG)为 3.89-6.11 mmol/L。;血糖如何维持稳定？关键酶调节关键酶如何调节：激素调节。 常见的升高血糖的激素：胰高血糖素、糖皮质激素和肾上腺素。 降低血糖的激素：胰岛素 ;对糖代谢的调节：胰岛素促进组织、细胞对葡萄糖的摄取和利用，加速葡萄糖合成为糖原，贮存于肝和肌肉中，并抑制糖异生，促进葡萄糖转变为脂肪酸，贮存于脂肪组织，导致血糖水平下降。胰岛素缺乏时，血糖浓度升高，如超过肾糖阈，尿中将出现糖，引起糖尿病。;如果调节失衡，结果是什么？高血糖或者低血糖。 低血糖：生理性和病理性。低于2.8 mmol/L。; 糖尿病（diabetes）是由遗传因素、免疫功能紊乱、微生物感染及其毒素、自由基毒素、精神因素等等各种致病因子作用于机体导致???岛功能减退、胰岛素抵抗等而引发的糖、蛋白质、脂肪、水和电解质等一系列代谢紊乱综合征，临床上以高血糖为主要特点，典型病例可出现多尿、多饮、多食、消瘦等表现，即“三多一少”症状，糖尿病（血糖）一旦控制不好会引发并发症，导致肾、眼、足等部位的衰竭病变，且无法治愈。 ;糖尿病的类型;一般正常人进食后血糖都会暂时性升高，进食后30分种或60分种可升到最高峰，但血糖一般不超过8.9 mmol/L；进食2小时后又会回到空腹水平，这就是人体对糖的耐受现象。 什么是口服葡萄糖耐量试验（Oral glucose tolerance test， OGTT）？ 有何临床意义？;口服葡萄糖耐量试验（Oral glucose tolerance test， OGTT）是一种口服葡萄糖负荷试验，用以了解人体对进食葡萄糖后的血糖调节能力。 通过OGTT试验，可以早期发现糖代谢异常，早期诊断糖尿病(Diabetes Mellitus, DM) ，是一种简单、快捷的诊断方法。; 实验前三天，受试者每日食物中糖含量不应低于150g，且维持正常活动，影响试验的药物应在三天前停用，受试前应空腹10-15h。 空腹取血后，5分钟内饮入250ml含75g无水葡萄糖的糖水，妊娠妇女用量为100g，儿童按1.75g/kg体重给予,不超过75g。 服糖后半小时，1小时，2小时，3小时各抽血一次，作血糖定量检测。于采血同时，每隔1小时留取尿液作尿糖试验，整个过程不可吸烟，喝咖啡，喝茶或进食。;测试前禁食10-16小时，清晨空腹进行。空腹抽静脉血，测空腹静脉血浆葡萄糖，然后成人口服75 g无水葡萄糖，溶于250 ml水中，5~10分钟内饮完。饮后2小时抽静脉血，测静脉血浆葡萄糖。;IFG 与 IGT;无糖尿病史，空腹或者随机血糖异常 无糖尿病史，有一过性或持续性糖尿 无糖尿病史，有明显糖尿病家族史 有糖尿病症状，但空腹或者随机血糖不够标准 分娩巨大胎儿的妇女和有巨大胎儿史的个体 不明原因肾病和视网膜病 妊娠期、甲亢、感染期出现糖尿者;血糖测定方法;原理葡萄糖在和碱性铜试剂混合加热后，可使 Cu2+还原成Cu+ ，后者与磷钼酸试剂作用生成蓝色的钼蓝。通过比色法测定蓝色化合物，计算出血糖的含量 稳定、准确、但对葡萄糖无特异性，受血中非糖还原物质的影响。 空腹正常血糖参考值 4.4~6.7mmol/L或80-120mg/dL;有机化学法：邻甲苯胺法;酶法：己糖激酶法（Hexokinase, HK）;酶法：葡萄糖氧化酶法（glucose oxidase, GOD）;葡萄糖氧化酶-过氧化物酶法原理;实验试剂;实验操作;葡萄糖氧化酶法可直接测定脑脊液的葡萄糖含量，但不能直接测定尿液葡萄糖含量。这是因为尿液中的尿酸等干扰物质浓度过高，可干扰过氧化物酶反应，造成结果假性偏低。 对于血液样品需及时分离红细胞。因为红细胞的酵解将会导致测定结果偏低。建议测定样品以草酸钾-氟化钠为抗凝剂以抑制糖酵解。;严重黄疸、溶血及乳糜样血清先制备无蛋白血滤液，然后在进行测定。 酶酚混合液一般现用现配。 葡萄糖氧化酶对 β - D 葡萄糖高度特异，溶液中的葡萄糖约 36% 为 α 型， 64% 为 β 型。葡萄糖的完全氧化需要 α 型到 β 型的变旋反应。葡萄糖变旋酶，可加速这一反应，延长孵育时间可达到完成自发变旋过程。新配制的葡萄糖标准液主要是 α 型，故须放置 2h 以上 ( 最好过夜 ) ，待变旋平衡后方可应用。 ;计算：;不同检测方法所提供的空腹正常血糖参考值存在差异。 葡萄糖氧化酶法：3.9~6.1mmol/L Folin-Wu法：4.4~6.7mmol/L 邻-甲苯胺法：3.9~6.1mmol/L;本法测定葡萄糖非常特异，从原理反应式中可知第一步是特异反应，第二步特异性较差。误差往往发生在反应