酶的特异性1.docVIP

《生物化学实验》授课教案 ? 授课时间 2010. 11. 2 第 6 次课 ? 授课章节酶的特异性任课教师及职称王增兰 教授教学方法 与手段讲授指导相结合，课后内容讨论课时安排3学时使用教材和 主要参考书教材《生物化学实验教程》第二版 刘箭、杜希华等编， 科学出版社，2010年 参考书：《生物化学实验原理和方法》李建武等编，北京大学出版社，1994年教学目的与要求： 学会酵母蔗糖酶（粗提液）和唾液淀粉酶的制备，了解酶的特异性及检测方法。教学重点，难点： 酶的特异性、蔗糖酶（粗提液）和唾液淀粉酶的制备教学内容： 实验六 酶的特异性 【实验目的】 1.了解酶的特异性 2.掌握检查酶特异性的方法及原理 【实验原理】酶是生物催化剂，酶对所作用的底物有严格的选择性，即酶的特异性。 淀粉和蔗糖都是非还原性糖，分别为唾液淀粉酶和蔗糖酶的专一底物。淀粉被唾液淀粉酶水解生成具有还原性的麦芽糖，蔗糖被蔗糖酶水解生成具有还原性的葡萄糖和果糖。 Benedict试剂（含有Cu2+）常用于检验还原糖的存在，其被还原后生成砖红色的氧化亚铜（Cu2O）沉淀。 【器材及试剂】 器材：1. 恒温水浴锅 2. 试管及试管架 3. 滤斗 4. 吸量管 5. 量筒 烧杯 离心机 （二）试剂： 1. 2%蔗糖 2. 1%淀粉（内含0.3%的NaCl）3. 唾液淀粉酶溶液 4. 蔗糖酶溶液 5. Benedict试剂 【实验步骤】 （一）淀粉酶的特异性 取试管5支，标号，按下表所列的次序操作： 试剂试管编号123451%淀粉溶液（ml）1.0—1.0——2%蔗糖溶液（ml）—1.0—1.0—唾液淀粉酶（ml）——1.01.01.0蒸馏水（ml）1.01.0——1.0 各管加完试剂后，放37℃恒温水浴保温10min，然后每管加入Benedict试剂2ml，再放沸水浴5min。观察各管颜色变化，并解释实验结果。 (二). 蔗糖酶的特异性 取试管5支，标号，按下表所列的次序操作： 试剂试管编号123451%淀粉溶液（ml）1.0—1.0——2%蔗糖溶液（ml）—1.0—1.0—蔗糖酶（ml）——1.01.01.0蒸馏水（ml）1.01.0——1.0 各管加完试剂后，放37℃恒温水浴保温10min，然后每管加入Benedict试剂2ml，再放沸水浴5min。 观察各管颜色变化，并解释实验结果。 【实验结果与分析】 1. 淀粉酶的特异性 2 蔗糖酶的特异性 复习思考题、作业题： 1.什么是酶的特异性？本实验如何验证了酶的特异性？ 2.若将淀粉酶和蔗糖酶煮沸1min，其实验结果会发生什么样的变化？下次课预习要点： 酶促反应速度以及温度、pH、激活剂和抑制剂对酶活性的影响实施情况及教学效果分析： 通过提问讲解以及观察实验现象，加深对酶的特异性概念的理解，掌握糖的还原性检测方法。通过对课后思考题的讨论，使学生弄清楚实验设计的思路。