1.2基因工程的基本操作程序(个人原创2015年)精讲.ppt

1.2 基因工程的基本操作程序;一、目的基因的获取;1. 从基因文库中获取目的基因;某生物体内全部DNA ;某种生物某个时期的mRNA;基因组文库与cDNA文库;2. 利用PCR技术扩增目的基因;2. 利用PCR技术扩增目的基因;2. 利用PCR技术扩增目的基因;PCR技术与体内DNA复制的区别：;3. 利用化学方法人工合成目的基因; 根据已知蛋白质的氨基酸序列，推测出相应的mRNA序列，然后按照碱基互补配对原则，推测出它的结构基因的核苷酸序列，再通过化学方法，以单核苷酸为原料合成目的基因。;一、目的基因的获取;二、基因表达载体的构建（核心）;二、基因表达载体的构建（核心）;表达载体;三、将目的基因导入受体细胞;（1）农杆菌转化法 ;Ti质粒 目的基因;（2）基因枪法（单子叶植物）;（3）花粉管通道法（被子植物）;2、将目的基因导入动物细胞的方法;2、将目的基因导入动物细胞的方法;3、将目的基因导入微生物细胞的方法;3、将目的基因导入微生物细胞的方法;;四、目的基因的检测与鉴定;四、目的基因的检测与鉴定;1、检测转基因生物染色体的DNA上是否插入了目的基因;1、检测转基因生物染色体的DNA上是否插入了目的基因;2、检测目的基因是否转录出mRNA;3、检测目的基因是否翻译出蛋白质;4、生物个体水平的鉴定;类 型;