周工作计划:
96孔板,用CVF激活补体,取不同时间点的样,检测细胞上清中TM、TF、PAI-1、t-PA的变化。
24孔板,用Hcy刺激内皮细胞,取不同浓度Hcy、不同时间点的样,检测细胞上清中IL-6、IL-8的变化。
预订磷酸化IkB-α抗体,练习WB。
开展高剂量绿原酸、咖啡酸、阿魏酸对内皮细胞的影响实验。
调整孵育时间,继续用不同浓度Hcy(终浓度为3、1、0.5mM)激活血清中的补体,用绵羊血红细胞检测所孵育样品的活性。
96孔板,用CVF激活补体,取不同时间点的样,检测细胞上清中TM、TF、PAI-1、t-PA的变化。
24孔板,用Hcy刺激内皮细胞,取不同浓度Hcy、不同时间点的样,检测细胞上清中IL-6、IL-8的变化。
开展高剂量绿原酸、咖啡酸、阿魏酸对内皮细胞的影响实验。
调整孵育时间,继续用不同浓度Hcy(终浓度为3、1、0.5mM)激活血清中的补体,用绵羊血红细胞检测所孵育样品的活性。
CVF激活补体试剂盒相关指标的测定:
1、将单层融合HMEC(含20%胎牛血清的1640培养)弃去培养基,加入2ml胰酶在37℃中消化2-3分钟后加入培养液终止消化,将细胞悬液移至离心管中960r/min离心10分钟,弃去上清液加入1ml含有20%胎牛血清的1640培养基,混匀后取10μl计数,根据计数将细胞悬液稀释,然后将HMEC以浓度为1×105个/ml接种96孔板,每
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